TY - JOUR ID - TI - Inactivation of Staphylococcal Virulence Factors Using a Diode Laser light-Activated Antimicrobial Agent تثبيط عوامل الضراوة لبكتريا العنقوديات الذهبية بإستخدام الليزرالثنائي الصمام AU - Norrya A. Ali نورية عبدالحسين علي AU - Dheyaa Khaleel Ismael ضياء خليل إسماعيل AU - Rafeef Yousif Rasheed رفيف يوسف رشيد جبر PY - 2015 VL - 9 IS - 2 SP - 94 EP - 101 JO - Journal of Biotechnology Research Center مجلة مركز بحوث التقنيات الاحيائية SN - 18151140 27081370 AB - Total of 120 samples were collected from different body sites and lesions for patients from both sexes. There were 78 isolates (65%) Staphylococcus aureus from them 37 isolates were Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Each isolate was exposed to diode laser 632nm wavelength with 300µM of methylene blue (MB) at 458.6 watt/cm2 for 15 minutes, both phenotypic and genotypic changes in virulence factors and the antibiotic-resistance were evaluated before and after irradiation with laser light. It was observed that the effect of sub-lethal dose on the antibiotic sensitivity was isolate-dependent. In general, results showed large variations in the susceptibility of antibiotic. Exposure to diode laser increased resistance to Vancomycin, in contrast increased sensitivity to Methicillin, Ciprofloxacin, and Norfloxacin. Also Results showed decreases the activity of β-haemolysin, with 33 (90.3%) isolates of S. aureus in comparison to the control as shown in blood agar method and haemolytic titration assay, but there was no effect on thermonuclease enzyme after irradiation. Detection of three genes represented in MRSA isolates by a confirmatory test was carried out using PCR technique. The results of the PCR amplification of mecA gene noted that it was present in 27(72.2%) S.aureus isolates and 14(83.3%) isolates showed reduction in β-toxin production after exposure to laser light, with no altered or deficiency in thermonuclease gene (nuc).

شملت الدراسة مئة وعشرين عينة تم الحصول عليها من مواقع مختلفة من الجسم لكلا الجنسين. عزلت منها ثمان وسبعين عزلةً (65%) بكتريا المكورات العنقودية الذهبية, وتم تحديد سبعة وثلاثين عزلة على انها بكتريا المكورات العنقودية الذهبية المقاومة للمثيسلين (MRSA). تم تعريض كل عزلة بكترية لضوء الليزر ذو الطول الموجي 632 نانوميتر، وبتركيز 300 مايكرمولر من المتحسس الضوئي المثلين الازرق (MB) وبجرعة458.6 واط / سم2 وبزمن تعريض خمسَ عشرةَ دقيقةً, تم تقيم التغيرات على عوامل الضراوة والحساسية لمضادات الحيوية من خلال فحص الأنماط المظهرية والجينية لها قبل وبعد التعرض لضوء الليزر. لوحظ إن تأثير لجرعة مادون القتل على حساسيتها للمضادات الحيوية كانت تعتمد عل العزلة. وبشكل عام تباينت بشكل واضح نتائج الحساسية لمضادات الحيوية للتحسس الضوئي. التعرض لضوء الليزر زاد من مقاومة العزلات البكتيرية لفانكومايسين بالمقابل زيادة في حساسية العزلات البكتيرية للمكورات العنقودية الذهبية للمثيسلين, سايبروفلاكساسين ونورفلاكساسين ومن خلال التحليل باستخدام وسط غراء الدم الاساس Base Blood Agar) ) وبطريقة قياس المعياري لهيمولايسين, لوحظ نقصان في إنتاج بيتا هيمولايسين مقارنة بالعزلات القياسية, حيث لوحظ ان 33 عينة من المكورات العنقودية الذهبية وبنسبة 90.3%. كما أظهرتُ النتائج إن التعرض لضوء الليزر لم يمتلك اى تأثير على ثبات انزيم النيوكليز للحرارة. أجري تشخيص تأكيدي لثلاث جينات موجودة في عزلات بكتريا المكورات العنقودية الذهبية المقاومة للمثيسلين (MRSA) باستخدام تقانة تفاعل سلسلة البلمرة, حيث اعطت نتائج الكشف عن وجود جين المقاومة للمثيسلين في27عينة بكترية وبنسبة ,72.2% و14 عينة بكترية وبنسبة83.3% اظهرت نقصان في قابلية انتاج بيتا هيمولايسين بعد التعرض لضوء الليزر ودون أي تغير او نقصان بالنسبة لثبات انزيم النيوكليز للحرارة. ER -