TY - JOUR ID - TI - Production, Purification and Characterization of Cellulose from Local Isolate of Pantoea spp انتاج وتنقية وتوصيف انزيم السيليليز من العزلة المحلية Pantoea spp AU - Mohmmed L. Atala محمد لفتة عطا الله AU - Hameed M. Jasim كاظم محمد إبراهيم AU - Kadhim M. Ibrahim حميد مجيد جاسم PY - 2015 VL - 56 IS - 2B SP - 1324 EP - 1330 JO - Iraqi Journal of Science المجلة العراقية للعلوم SN - 00672904 23121637 AB - Soil samples from fields cultivated with barley and wheat in addition to samples from spoiled orange and apple fruits and carrot roots were collected with the aim to isolate cellulase producing bacterial strains. Bacterial isolates obtained from these samples were grown on a selective medium containing carboxymethyl cellulose (CMC) as a sole source for carbon and energy. Results showed that nine isolates out of fifty were able to produce cellulase.The specific activity of cellulase in culture filtrate of the most efficient isolate was 1.601 u/mg protein.This isolate was identified according to its morphological characteristics and biochemical tests, and then by using Api 20-E and VITEK-II identification systems and was identified as Pantoea dispersa. Cellulase produced by P. dispersa was purified throughout four purification steps including ammonium sulfate precipitation, dialysis followed by purification with ion exchange chromatography using DEAE-cellulose, and then gel filtration throughout sephadex-G200. Purification results showed that the specific activity of the purified enzyme was 1181.8 u/mg protein with a purification fold and yield 115.2 and 26.6% respectively. Purified cellulase from Pantoea dispersa was well characterized by studying some enzyme characteristics. The molecular weight of cellulase was 15148 dalton, and pH 7.0 was the optimum for enzyme activity and stability, while 30 ºC was the optimum for enzyme activity and stability.

جمعت عينات من التربة المزروعة بالحنطة والشعير بالإضافة إلى عينات من فاكهة البرتقال والتفاح وجذور الجزر التالفة، بهدف عزل سلالات بكتيرية منتجة للسيليليز . نميت العزلات البكترية المعزولة من هذه العينات على أوساط انتحابية متضمنة carboxymethyl cellulose كمصدر وحيد للكربون والطاقة . أظهرت النتائج إن 9 عزلات من بين 50 عزلة قادرة على إنتاج السيليليز. كانت الفعالية النوعية للسيليليز في الراشح البكتيري للعزلة الأكثر كفاءة هو 1.601 وحدة/ملغم بروتين. شخصت العزلة اعتمادا على الصفات المظهرية والاختبارات الكيميوحيوية ثم باستعمال Api 20-E و VITEK II وكانت العزلة هي Pantoea dispersa . تمت تنقية السيليليز المنتج من قبل هذه العزلة بأربع خطوات تنقية وهي الترسيب بكبريتات الامونيوم والديلزة ثم التنقية بالمبادل ألايوني DEAE-Cellulose ثم بالترشيح الهلامي خلال Sephadex G200 . اظهرت النتائج فعالية نوعية للإنزيم المنقى 1181.8 وحدة/ملغم بروتين مع عدد مرات تنقية 115.2 وحصيلة 26.6%. تم توصيف الإنزيم المنقى للعزلة Pantoea dispersa من خلال دراسة بعض صفات الإنزيم إذ كان الوزن الجزيئي للإنزيم هو 15148 دالتون، والرقم الهيدروجيني الامثل لفعالية وثبات الإنزيم هو 7، بينما درجة الحرارة 30 °م هي الأمثل لفعالية وثبات الإنزيم . ER -