TY - JOUR ID - TI - Osteogenesis of Mesenchymal Stem Cells Derived from Bone Marrow in vitro AU - Shalal M. Hussein AU - Shahlaa M. Salih AU - Sally T. Younis PY - 2015 VL - 18 IS - 4 SP - 118 EP - 123 JO - Al-Nahrain Journal of Science مجلة النهرين للعلوم SN - 26635453 26635461 AB - This study was designed to evaluate osteogenic potential of mesenchymal stem cells (MSCs) isolated from mouse bone marrow in vitro. MSCs were isolated through collecting the thigh bone (femur and tibia). Cells were flushed from bones and MSCs isolated based on the ability of adherence to plastic surfaces. Reactivity MSCs to CD105 and CD34 were tested by immunocytochemistry. Isolated MSCs exhibited positive reactivity to CD105 and negative for the haematopoietic surface marker CD34. Differentiation of isolated MSCs into osteoblast was induced by osteogenic medium consisting of high glucose- Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) supplemented with 50 µg /ml Ascorbic acid, 1nM dexamethasone and10 Mm of beta glycerophosphate disodium salt hydrate after 21 days. Osteoblast activity was monitored by evaluation alkaline phosphatase (ALP) activity in osteogenic medium by Reflotron at (0, 7, 14 and 21) days of differentiation. Results recorded that a significant increase in Alkaline phosphatase activity in osteogenic medium at 7 and 14 day culture in comparison with zero day and decreased at 21 day.

صممت الدراسة الحالية لتقييم إمكانية تحول الخلايا الجذعية الوسيطة المعزولة من نخاع عظم الفأر الى خلايا مولدة لخلايا العظم في المختبر. عزلت الخلايا من عظم فخذ 50 فأرة على أساس قدرة التصاقها بالسطوح البلاستيكية. اختبرت الخلايا الجذعية الوسيطة للمعلمات CD105 الخاص بالخلايا الجذعية الوسيطة و CD34 الخاص بالخلايا الجذعية المولدة لخلايا الدم بواسطة كيمياء الخلوية المناعية. أظهرت الخلايا الجذعية الوسيطة المعزولة تفاعلا ايجابيا أتجاه CD105 سلبيا للمعلم على سطح الخلايا الجذعية المولدة لخلايا الدم CD34. حفزت الخلايا الجذعية الوسيطة المعزولة على التمايز لخلايا مولدة لخلايا العظم بواسطة وسط مكون يتألف من DMEMمع 50 ميكروغرام/ مل حمض الأسكوربيك، 1نانو مولاري ديكساميثازون و10 ملي مولاري بيتا كليسروفوسفيت هيدرات الصوديوم بعد 21 يوما. درست فعالية الخلايا المولدة لخلايا العظم عن طريق تقييم فعالية انزيم الفوسفاتيزالقاعدي (ALP) في الوسط المكون لخلايا العظم بواسطة Reflotron بعد فترات مختلفة من التمايز (0، 7، 14، 21) يوما. سجلت النتائج زيادة معنويةP≤0.05 في فعالية ALP في وسط التمايز في اليوم 7 و 14 مقارنة مع اليوم صفر (32.13 ± 0.46 و 23.33 ± 0.88 مقابل 5.22 ± 1.76 وحــــــدة دوليــــة/ لتـــــــر) وانخفضـــــت فـــي اليــــــــوم 21(15.33±1.76 وحدة دولية/لتر. تم التأكد من وجود جينات بيتا الأكتين وأوستيوكالسين في الخلايا المتمايزة من قبل (RT-PCR) بعد 14 يوما من التمايز. اكدت النتائج ظهور حزمتين بحجم الجزيئي (200) زوج قاعدي لبيتا الأكتين و (169) زوج قاعدي لأوستيوكالسين. ER -