TY - JOUR ID - TI - Isolation and Purification of a Cyclooxygenase-2 from the Blood of a Patient Suffering from Rheumatoid Arthritis and Studying the Effect of Natural Products of the Soapwort on the Activity of Purified Enzyme عزل وتنقية انزيم السايكلوكسي جينيز-2 من دم مريض يعاني التهاب المفاصل الرثوي ودراسة تأثير النواتج الطبيعية لنبات العصلج على فعالية الانزيم المنقى AU - Osama M. AL-Sabaawy اسامة ميسر محمود السبعاوي AU - Mohammed B. Al-Sadoun محمد بحري حسن السعدون PY - 2016 VL - 13 IS - 1 SP - 133 EP - 145 JO - Baghdad Science Journal مجلة بغداد للعلوم SN - 20788665 24117986 AB - In this paper to isolate and study the properties of the cyclooxygenase-2 (EC: 1.14.99.1) enzyme in the blood of a patient suffering from rheumatoid arthritis and study the effect of natural products of the Soapwort on the activity of purified enzyme. The study involves taking 30 ml of blood from an adult woman 40 years old, who suffers from rheumatoid arthritis disease for 13 years. Serum is separated and subjected to a series of purification processes including: precipitation by ammonium sulfate, filtration by centrifugation radiator, dialysis in presence of ammonium bicarbonate, separation using the technology of ion exchange, lipholization and then estimating approximate molecular weight of the enzyme using gel filtration technique and sodium dodecyl sulfate (SDS)-page polyacrylamide gel electrophoresis. The study also includes isolating the natural products of Soapwort plant and study the effect of isolated natural products on the activity of the purified enzyme. The result of the study indicates that cycloxygenase-2 has an approximate molecular weight of 71.5 kDa and that the extracted oil of the Soapwort has a negative impact on the activity of the enzyme (r= -0.824; P=0.006), while flavonoids and Saponin have no such impact (r= -0.565; P=0.113; r= -0.634; P=0.067 respectively).

في هذا البحث تم عزل ودراسة خصائص انزيم السايكلوكسي جينيز-2 (EC: 1.14.99.1) في مصل دم مريض مصاب بالتهاب المفاصل الرثوي ودراسة تأثير النواتج الطبيعية المفصولة من نبات العصلج على فعالية الانزيم المنقى. تضمنت الدراسة اخذ عينة دم بحجم 30 مل من امرأة بالغة بعمر 40 سنة تعاني مرض التهاب المفاصل الرثوي مدة 13 سنة. بعد فصل مصل الدم اخضع لسلسلة من عمليات التنقية المتضمنة: الترسيب بكبريتات الامونيوم, الترشيح بالطرد المركزي المبرد, الفرز الغشائي بوجود كبريتات الامونيوم, الفصل بتقنية التبادل الايوني, التجفيد ثم تقدير الوزن الجزيئي التقريبي للأنزيم بكل من تقنيتي الترشيح الهلامي والهجرة الكهربائية. كما تصمنت الدراسة عزل النواتج الطبيعية لنبات العصلج ودراسة تأثيرها على فعالية الانزيم المنقى. وضحت نتيجة الدراسة ان انزيم السايكلوكسي جينيز-2 يمتلك وزن الجزيئي تقريبي يساوي (71.5) كيلو دالتون و ان ناتج الزيت المعزول من نبات العصلج له تأثير سلبي على فعالية الانزيم المنقى (r= -0.824; P=0.006), بينما لايظهر ناتج الفلافونويدات والصابونين مثل هذا التأثير(r= -0.565; P=0.113; r= -0.634; P=0.067) على التوالي. ER -