TY - JOUR ID - TI - The Biological Activity of Protein Extracts of Bacillus spp. Isolated from Soil against Some Pathogenic Bacteria AU - Haneen A. Ibrahim AU - Neihaya H. Zaki PY - 2019 VL - 30 IS - 4 SP - 29 EP - 38 JO - Al-Mustansiriyah Journal of Science مجلة علوم المستنصرية SN - 1814635X 25213520 AB - Forty soil samples were collected from different regions in Baghdad city. Among 52 isolates, only 38 (73.1 %) belonged to Bacillus spp. All bacterial isolates were submitted to the cultural, microscopical, biochemical examination and VITEK 2 System. Bacillus cereus was the predominant (21; 55.3%) followed by Bacillus subtilis (11; 28.9%), then Bacillus amyloliquefaciens (6;15.8%). B. cereus (B1) and B. subtilis (B16) isolates showed the highest level of antibacterial activity; therefore, their extracellular proteins were extracted, purified using ammonium sulfate (80%) saturation, and submitted to Sepharose-6B gel filtration column. SDS-polyacrylamide gel electrophoresis was used to determine the molecular weights of the proteins, in which one band of molecular weight 68 and 50kDa was found in B. cereus and B. subtilis respectively. These proteins revealed high antibacterial activity on Gram positive bacteria, and moderate effect on Gram negative bacteria, except Pseudomonas aeruginosa where no effect was reported. The antibiofilm activity of the extract showed increased effect against Streptococcus pyogens, while moderate effect against each of Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Serratia marcescens, Klebsiella spp with no impact against P.aeruginosa. The results of cytotoxicity indicated that the purified extract had a higher cytotoxic effect on the breast cancer cell line MCF7 cells at 1000µg/ml concentration, than the crude extract that showed cytotoxic effect on the same cell line at 100µg/ml.

تم جمع أربعين عينة من التربة من مناطق مختلفة في مدينة بغداد. من بين 52 عزلة ، فقط 38 (73.1 ٪) تنتمي إلى Bacillus spp. خضعت جميع العزلات البكتيرية للفحص المزرعي والمجهري والكيموحيوي ونظام VITEK 2. كان جنس Bacillus cereus هو الغالب (21 بنسبة 55.3 ٪) يليه Bacillus subtilis (11؛ 28.9 ٪) ، ثم Bacillus amyloliquefaciens ؛ 15.8 ٪). أظهرت العزلات B. cereus (B1) و B. subtilis (B16) أعلى مستوى من النشاط المضاد للبكتيريا. لذلك ، تم استخلاص البروتينات خارج الخلوية ، وتنقيتها باستخدام كبريتات الأمونيوم بنسبة تشبع (80 ٪) ، ومن ثم استخدم عمود الترشيح بهلام Sepharose-6B. تم استخدام هلام البولي اكريلامايد SDS-polyacrylamide gel electrophoresis لتحديد الأوزان الجزيئية للبروتينات ، حيث تم العثور على حزمة واحدة بالوزن الجزيئي 68 و 50 كيلو دالتون لكل من B. cereus و B. subtilis على التوالي. كشفت هذه البروتينات عن نشاط مضاد للجراثيم على البكتيريا إلايجابية لجرام ، وتأثير معتدل على البكتيريا السالبة لجرام ، باستثناء Pseudomonas aeruginosa حيث لم يظهرأي تأثير. أظهرالنشاط المضاد للغشاء الحيوي في المستخلص تأثيرًا متزايدًا على Streptococcus pyogens ، في حين كان هناك تأثير معتدل ضد كل من المكورات العنقودية الذهبية ، الإشريكية القولونية ، سيراشيا مارسيسنس ،انواع الكليبسيلا مع عدم وجود تأثير ضد P.aeruginosa. أشارت نتائج فحص السمية الخلوية بالمستخلص المنقى كان له تأثير سام عالي لخلايا سرطان الثدي MCF7 لخلايا سرطان الثدي بتركيز 1000 ميكروغرام/مل وهو اعلى من المستخلص الخام الذي أظهر تأثير سام للخلايا على نفس خط الخلية عند 100 ميكروغرام/مل. ER -