TY - JOUR ID - TI - STUDY THE INHIBITION ACTIVITY OF PURIFIED BACTERIOCIN FROM LOCAL ISOLATION Lactococcuslactis ssp. lactisagainst SOME PATHOGENIC BACTERIAL SPECIES ISOLATED FROM CLINICAL SAMPLES دراسة الفعالية التثبيطية للبكتريوسين المنقى من العزلة المحلية Lactococcuslactis ssp. Lactis تجاه بعض البكتريا الممرضة المعزولة من عينات سريرية AU - RaghadAkram Aziz رغد أكرم عزيز AU - Jehan Abdul Sattar Salman2 جيهان عبد الستار سلمان2 AU - Alaa Hussein Hamel1 علاء حسين هامل PY - 2020 VL - 12 IS - 2 SP - 34 EP - 49 JO - iraq journal of market research and consumer protection المجلة العراقية لبحوث السوق وحماية المستهلك SN - 20713894 25236180 AB - This study aimed to study the inhibition activity of purified bacteriocin produced from the local isolation Lactococcuslactis ssp. lactis against pathogenic bacteria species isolated from clinical samples in some hospitals Baghdad city. Screening of L. lactis ssp. Lactis and isolated from the intestines fish and raw milk was performed in well diffusion method. The results showed that L. lactis ssp. lactis (Lc4) was the most efficient isolate in producing the bacteriocin as well observed inhibitory activity the increased that companied with the concentration, the concentration of the twice filtrate was better in obtaining higher inhibition diameters compared to the one-fold concentration. The concentrated bacteriocin was purified using the gel filtration column and Sephacryl S-200. The results showed the high inhibitory activity of the purified bacteriocin after the purification against the positive and negative bacteria of the Gram stain under study compared to the one-fold concentration and two-fold before purification , The diameters of the inhibition zones after gel-filtering of the purified bacteriocin reached S. aureus, S. epidermidis, P. aeruginosa, E. coli, E. clocae and S. marcescens (23, 25, 26, 20, 22 and 28) Mm respectively. The carbohydrate content of purified bacteriocin from L. lactis ssp. lactis (Lc4) isolate was 6.02% with a molecular weight of 6310 Dalton. The results showed that purified bacteriocin retained its inhibitory activity at pH 2-10 and showed the highest inhibition at pH 4-6 and lost at pH 12. The purified bacteriocin was characterized by thermal stability. It retained its effectiveness when exposed to 40, 60, 80, 100°C for 30, 15, 5 minutes and 120°C for 15.5 minutes and lost 50% of its effectiveness when exposed to 120°C for 30 minutes. Results The purified bacteriocin was effectively retained when treated with enzyme pepsin and trypsin of 37°C for one hour and at pH 7.

هدفت البحث الى دراسة الفعالية التثبيطية للبكتريوسين المنقى من العزلة المحلية Lactococcuslactis ssp. lactis تجاه أنواع البكتريا المسببة للأمراض المعزولة من عينات سريرية في بعض مستشفيات بغداد، اذ اجريت غربلة للعزلات العائدة لبكتريا Lactococcuslactis ssp. lactis والمعزولة من امعاء الاسماك والحليب الخام بطريقة الانتشار بالحفر, وبينت النتائج أن العزلة (Lc4) L. lactis ssp. lactis هي الاكفـأ في إنتاج البكتريوسين كما لوحظ زيادة فعاليتها التثبيطية بزيادة تركيزه وأن تركيز الراشح لمرتين كان الأفضل في الحصول على اقطار تثبيط أعلى مقارنة مع المركز لمرة واحدة, وشملت خطوة تنقية البكتريوسين تركيز الراشح الخام، ثم اجراء التنافذ الغشائي والترشيح الهلامي باستعمال Sephacryl S-200, وأظهرت النتائج عند دراسة مرحلة التنقية ارتفاع الفعالية التثبيطية للبكتريوسين بعد التنقية تجاه البكتريا الموجبة والسالبة لصبغة كرام قيد الدراسة مقارنة مع الراشح المركز لمرة واحدة ولمرتين قبل التنقية، أذ بلغت اقطار مناطق التثبيط بعد اجراء الترشيح الهلامي للبكتريوسين المنقى 23و 25 و26 و20 و22 و28 ملم تجاه كلاً من بكتريا S. aureus، S. epidermidis وP. aeruginosa وE. coli وE. clocae وS. Marcescens على التوالي، وبلغ المحتوى الكربوهيدراتي للبكتريوسين المنقى 6.02% فيما بلغ الوزن الجزيئي لها 6310 دالتون، وبينت النتائج ان البكتريوسين المنقى قد احتفظ بفعاليته التثبيطية عند الأرقام الهيدروجينة من 2 الى10 وظهر أعلى تثبيط له عند الرقم الهيدروجيني من 4 الى6 فيما فقد فعاليته عند الرقم الهيدروجيني 12، فيما تميز البكتريوسين المنقى بالثبات الحراري، إذ احتفظ بفعاليته عند تعريضه لدرجات حرارة مختلفة 40 و60 و80 و100م ولمدد زمنية مختلفة 5 و10و30 دقيقة ولدرجة حرارة 120م لمدة 5 و15 دقيقة وفقد 50% من فعاليته عند تعريضه لدرجة حرارة 120م لمدة 30 دقيقة، كما اوضحت النتائج ان البكتريوسين المنقى احتفظ بفعاليته عند معاملته بأنزيم الببسين والتربسين بدرجة حرارة 37م لمدة ساعة واحدة وعند رقم هيدروجيني7. ER -