TY - JOUR ID - TI - AGROBACTERIUM-MEDIATED TRANSFORMATION OF TWO TOMATO CULTIVARS (LYCOPERSICON ESCULENTUM MILL.) CV. SANDRA AND ROCKY استعمال تقانة الاكروبكتريوم لأنتاج نباتات الطماطة المعدلة وراثيا في صنفي ساندرا وروكي AU - Danial & et al. دانيال وآخرون PY - 2021 VL - 52 IS - 3 SP - 745 EP - 755 JO - Iraqi Journal of Agricultural Sciences مجلة العلوم الزراعية العراقية SN - 00750530 24100862 AB - An efficient protocol for Agrobacterium-mediated transformation of tomato cultivars Sandra and Rocky was conducted to examine the possibility of producing transgenic tomato plants cultivars harbouring the nptII gene, conferring kanamycin resistance. To achieve this aim, tomato cotyledon explants were transformed using EHA105 Agrobacterium tumefaciens strain harboring the binary vectors pBI121 which contains Gus gene, and neomycin phosphotransferase II (nptII) as selectable marker gene under the control of a CaMV35S promoter and nopaline synthase (nos) Terminator. Transformant detection was carried out in three distinct ways. First antibiotic selection, Kanamycin at a concentration of100 mgl-1 found to be efficient for this purpose. Second histochemical GUS assay revealed the presence of blue colored zones in a number of shoots and leaves for both in vitro and the greenhouse-grown transgenic plants. Third PCR analysis indicated positive result by showing the fragment for nptII gene in tested transformants, while was absent in non-transgenic control (wild type). On the other hand, the results showed that Sandra cultivar was more efficient for regeneration and subsequently transformation frequency than Rocky cultivar, which record 26.66% of transformation frequency compared with 11.57% in Rocky cultivar.

جريت الدراسةلاختبار امكانية انتاج نباتات الطماطة المعدلة وراثيا في صنفي (ساندرا وروكي) تأوي المورثة nptII التي تمنح صفة المقاومة للمضاد الحيوي كاناميسين. لتحقيق هذا الهدف تم اجراء التحول الوراثي لنبات الطماطة عن طريق الاوراق الفلقية باستعمال السلالة البكتيرية EHA105 التي تأوي الناقل الثنائي pBI121 الذي يحمل المورثتين GUSو نيوميسين فسفوترانسفيراز nptII تحت سيطرة البادئ CaMV35S والناهي nos. حيث تم الكشف عن عملية التحول الوراثي بثلاث طرق ، اختبار المضادات الحيوية حيث وجد ان المضاد الحيوي الكاناميسين بتركيز100ملغرام⁄ لتر كان فعالا في الكشف عن عملية التحول الوراثي ، ثانيا الكشف النسيجي الكيميائي GUS الذي كشف عن وجود مناطق زرقاء مخضرة اللون في عدد من البراعم والاوراق للنباتات المعدلة وراثيا في المختبر وفي البيت الزجاجي و ثالثا تحليل التفاعل التسلسلي البوليمرازي PCR. اظهرت نتائج ايجابية من خلال اظهار حزم للمورثة nptII في النباتات المعدلة وراثيا ، بينما لم تظهر مثل تلك الحزم في المجموعة الضابطة (النباتات غير معدلة وراثيا) النوع البري. وقد اوضحت النتائج ان صنف ساندرا كان اكثر كفاءة في عملية التمايز والتحور الوراثي ، اذ بلغت نسبة التحول الوراثي فيه 26,66% مقارنة مع صنف روكي حيث بلغت نسبتها 11,57% . ER -