TY - JOUR ID - TI - A Restriction Enzyme from Escherichia coli Purification and General Properties أنزيم مقيد من بكتريا القولون التنقية والخواص العامة AU - Maysem Modaffer Al-Obaidy AU - Nadia Tariq Barakat AU - Mukaram Shikara PY - 2009 VL - 27 IS - 5 SP - 954 EP - 961 JO - Engineering and Technology Journal مجلة الهندسة والتكنولوجيا SN - 16816900 24120758 AB - An endonuclease restriction enzyme has been purified from E. coli about 40-fold withDNAse and RNAse recoveries of about 3%. The purification steps included precipitationof the enzyme with ammonium sulphate, and reclaimed it through Sephadex G-100 andDEAE-cellulose chromatography. The purified endonuclease was able to break lambdaDNA into three bands. The enzyme has 5% of carbohydrate moiety which means it is aglycoprotein. Lastly, the comparison with other commercial restriction endonucleasesproves that this enzyme is a restriction enzyme with enzymic activity dependent onMg2+

تمت تنقية أنزيم مقيد من بكتريا القولون حوالي 40 -مرة مع استرداد مقداره 3% ، وتضمنت خطوات التنقية ترسيب الانزيم بواسطة كبريتات الأمونيوم ثم استرجاعه بواسطة كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي (خلال عمودي سيفادكس - 100 و دي -سليلوز)، وتم اختبار الأنزيم من خلال قطعه لدنا العاثية لامبدا إلى ثلاثة حزم، كما وجد 5% كربوهدرات مما يعني كونه بروتين سكري . أخيراً، ومع مقارنة الانزيم بانزيمات مقيدة تجارية، فأن الأنزيم أثبت أنه أنزيم مقيد يعتمد في نشاطه على أيون المغنيسيوم. ER -