TY - JOUR ID - TI - ISOLATION AND PURIFICATION OF GLUCOSYLTRANSFERASE FROM MUTANS STREPTOCOCCUS SOBRINUS (SEROTYPE G) LOCAL ISOLATE عزل وتنقية الكلوكوسيل ترانسفيريز من العزلة المحلية من بكتريا (Streptococcus sobrinus (Serotype G AU - Abd Al-Wahid Al-Shaibany عبد الواحد باقر AU - Nidhal Abdul Mohymen نضال عبد المهيمن محمد AU - Essam F. Al-Jumaily عصام فاضل الجميلي AU - Nada H. Al-Mudallal ندى هشام المدلل PY - 2010 VL - 8 IS - 4 SP - 10 EP - 18 JO - IRAQI JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES المجلة العراقية للعلوم الطبية SN - 16816579 22244719 AB - Background: Glucosyltransferase is an extracellular enzyme produced by mutans streptococci responsible for polymerizing the glucose moiety of sucrose to form glucan.Objective: Isolation and purification of glucosyltransferase from mutans Streptococcus sobrinus.Methods: The enzyme was purified from mutans Streptococcus sobrinus byultrafiltration , adsorption chromatography, ion-exchange by DEAE-cellulose and gel filtration by Sephacryl S-200.Results: Large scale production, concentration and purification of mutans streptococci (S.sobrinus) (serotype G) N10 glucosyltransferase (GTF) were done by ultrafiltration-method using an Amicone-filter P50,adsorption hromatography (hydroxyapatite beads), ion-exchange chromatography (DEAEcellulose column) and gel-filtration chromatography using (Sephacryl S-200)column. Three purified GTF enzymes (GTF-Ia,GTF-Ib, GTF-II) were detected with a specific activity of (31.60; 31.50 and 66.270) Unit/mg protein respectively and the fold of purification are (27.59; 27.92 and 58.75 respectively with yield of enzymes (14; 10.94 and 17.11 %) respectively.Conclusion:The purified enzyme with accepted yield may open new approaches for its using in oral passive immunization against dental caries in experimental animals by using hen egg yolk antibodies specific for cell associated GTF of mutans streptococci bacteria. Keywords: glucosyltransferase , Streptococcus sobrinus, purification, adsorptionchromatography.

خلفية الدراسة: يعد انزيم الكلوكوسيل ترانسفيريز من الانزيمات المفرز خارج الخلية والمنتج من بكتريا المكورات الفموية والذي يعمل على بلمرة السكريات وتحولها الى الكلايكون .هدف الدراسة: عزل وتنقية انزيم الكلوكوسيل ترانسفيز من العزلة المحلية من بكتريا streptococcus sorbrinus (Serotype G) طريقة العمل: تم تنقية الانزيم من بكتريا Streptococcus sobrinus باستخدام الترشيح الفائق وكروموتوغرافيا الادمصاص و كروماتوغرافيا التبادل الايوني (DEAE) والترشيح الهلامي Sephacryl S-200 .النتـائج: تم الانتاج المعياري الواسع والتركيز والتنقية للكلوكوسيل ترانسفيريز لبكتريا المكورات الفموية من النوع S. sobrinus(serotype G) العزلة N10 بواسطة الترشيح الفائق باستخدام مرشح (Amicon –P50) وكروموتوغرافيا الادمصاص ( حبيبات هيدروكسي البيتايت) وكروموتوغرافيا التبادل الايوني (DEAE-Cellulose) وكروموتؤغرافيا الترشيح الهلامي باستخدام هلام Sephacryl S-200 . تم تنقية ثلاث انزيمات من الكلوكوسيل ترانسفيريز (GTF-II , GTF-Ib, GTF-Ia) بفعالية نوعية ( 31.60 و 31.50 و 66.270) وحدة / ملغم بروتين على التوالي وعدد مرات تنقية 27.59 و 27.92 و 58.75 مرة على التوالي و بحصلية انزيمية 14 و 10.94 و 17.11 % على التوالي . الاستنتاج: الانزيم المنقى مع حصلية انزيمية مقبوله ممكن ان تفتح طريقا نحو دراسات مستقبلية لاستخدامه في استحداث الاستجابة المناعية ضد تسوس الاسنان في تجارب الحيوانية بواسطة استخدام الاجسام المضادة للصفار البيض المتخصص للخلايا المتفاعلة مع الانزيمات الكلوكوسيل ترانسفيريز GTF من المكورات الفموية . ER -