@Article{, title={Extraction and purification of L-Asparaginase II from local isolate of Proteus vulgaris استخلاص وتنقية أنـزيم L-Asparaginase II المنتج مـن بكتريـا vulgaris Proteus المعزولة محلياً}, author={Sarab K. Salman سراب سلمان كاظم and Methal A. Abd Aon مثال عبد الكريم عبد عون and Shahlaa A. Hassan شهلاء علي حسن and Asmaa M. Suo’d اسماء محمد سعود and Rawaa J. Toma رواء جميل توما}, journal={Baghdad Science Journal مجلة بغداد للعلوم}, volume={8}, number={1عدد خاص بمؤتمر علوم الحياة}, pages={509-518}, year={2011}, abstract={Forty one isolates of genus Proteus were collected from 140 clinical specimens such as urine, stool, wound, burn, and ear swabs from patients of both sex. These isolates were identified to three Proteus spp. P. mirabilis, P. vulgaris and P. penneri .The ability of these bacteria to produce L-asparaginase II by using semi quantitative and quantitative methods was determined. P. vulgaris Pv.U.92 was distinguished for high level of L-asparaginase II production with specific activity 1.97 U/mg. Optimum conditions for enzyme production were determined; D medium with 0.3% of L-asparagine at pH 7.5 with temperature degree 35°C for incubation. Ultrasonication was used to destroy the P. vulgaris Pv.U.92 cells then ASNase II was extracted and purified throughout several purification steps including precipitation with (NH4)2SO4(60-80%), DEAE-cellulose ion exchanger chromatography followed by Sephacryl S-300 filtration. The specific activity was 155.6 U/ mg and the purification fold was 27.3 with 10.4% yield.

تم الحصول على 41 عزلة تعود لجنس Proteus من مجموع 140 عينة سريريه من عينات مختلفة شملت عينات الإدرار، الخروج، الجروح، الحروق ومسحات الإذن لكلا الجنسين. هذه العزلات تم تشخيصها وفقـاً لصفاتـها المظهريـة والاختبارات الكيموحياتية إلى ثلاثـة أنواع هيP. mirabilis ، P. vulgari و P. penneri. أختبرت قابلية هذه العزلات لإنتاج إنزيم L-asparaginase II باستخدام طرائق كمية وشبه كمية. وقد أختيرت بكتريا P. vulgaris Pv.U.92 كأفضل عزلة منتجة للأنزيم حيث بلغت الفعالية النوعية للإنزيم 1.97 وحدة/مليغرام. حددت الظروف المثلى للإنتاج وكان الوسط D المحتوى على%0.3 من المادة الأساس (L-asparagine) عند الأس الهيدروجيني 7.5 الأمثل لإنتاج الإنزيم عند حضنه بدرجة حرارة 35 مº.أستخلص ASNase II من خلايا P. vulgaris Pv.U.92بعد تكسيرها بطريقة الأمواج الصوتية الفائقة (ulrasonication) ثم رسب المستخلص الناتج بأملاح الامونيوم (% 80-60) ونقي الإنزيم باستعمال المبادل الأيوني DEAE-cellulose ثم مرر بعمود Sephacryl S-300 وقد بلغت الفعالية النوعية 155.6 وحدة/مل غرام وبمحصلة إنزيمية % 10.4 وبعدد مرات التنقية 27.3 .} }