@Article{, title={Molecular diagnosis of E.coliO157:H7 Which Isolated from Children with Diarrhea by using Multiplex PCR التشخيص الجزيئي لبكتريا E.coliO157:H7المعزولة من براز أطفال مصابين الإسهال باستخدام Multiplex Polymerase Chain Reaction}, author={Ayad M.Ali أياد محمد علي فاضل and Amna N. Jassim آمنة نصيف جاسم and Shatha T. Ahmed شذى ذنون أحمد}, journal={Baghdad Science Journal مجلة بغداد للعلوم}, volume={7}, number={عدد خاص بمؤتمر العلمي النسوي 1}, pages={207-215}, year={2010}, abstract={A total of 96 stool samples were collected from children with bloody diarrhea from two hospitals in Baghdad. All samples were surveyed and examined for the presence of the Escherichia coli O157:H7 and differentiate it from other Non -Sorbitol Fermenting Escherichia coli (NSF E. coli). The Bacterial isolates were identifed by using morphological diagnostic methods, Samples were cultured on liquid enrichment medium, incubated at 37C for 24 hrs, and then cultured on Cefixime Tellurite -Sorbitol MacConkey Agar (CT- SMAC). 32 non-sorbitol fermenting bacterial isolates were obtained of which 11 were identified as Escherichia coli by using traditional biochemical tests and API20E diagnostic system without differentiation between serotype O157:H7 and other NSF E. coli isolates . Four special biochemical tests were done for serotype O157:H7 differentiation from other NSF bacteria. Only 3 isolates belonging to the serotype O157:H7 were obtained . Latex agglutination test for O157 and H7 showed that the 3 isolates gave positive results with both tests. The Bacterial isolates were identifed by using Multiplex Polymerase Chain Reaction (MPCR) technology for the presence or absence of 4 genes (Stx1, Stx2, hlyA and eaeA) that encode for main virulence factors to diagnose E. coli O157:H7 isolated By using specific primers in MPCR . The result showed that one E. coli O157:H7 isolates contain all 4 genes , other isolates contain 3 genes: Stx2, hlyA & eaeA.

جمعت 96 عينة براز لأطفال مصابين بالإسهال الدموي من مستشفى أطفال العلوية ومستشفى المنصور التخصصي. اجري المسح لجميع العينات للتحري وعزل بكتريا Escherichia coli O157:H7 وتمييزهــا عــن باقـي ســلالات E.coli غيــر المخــمرة للسور بتول Non-Sorbitol Fermenting Escherichia coli ((NSF E.coli. شخصت العزلات البكتيرية بإستخدام طرائق التشخيص المظهري حيث زرعت العينـات على وسـط اغنائي سـائل وحضنت بــدرجة حرارية 37 م لمدة 24 ساعة تبعها الزرع على وســط Cefixime - Tellurite Sorbitol MacConkey Agar (CT-SMAC). تم الحصول على 32 عزلة بكتيرية غيرمخمـرة للســوربتول شـخص منها 11 عزلة E.coli وذلك باستخدام الاختبارات الكيموحيوية التقليدية ونظام التشخيص API20E والتي لم تعطِ نتائج كافية تمكن من تفريق النمط المصلي O157 بشكل نهائي عن باقي عزلات NSF E.coli. أجري أربع اختبارات كيموحيوية خاصة لتشخيصE.coli النمط المصلي O157:H7وتمييزه عن باقي NSF E.coli وأظهرت النتائج أن3 عزلات فقط كانت من النمطO157:H7 ، ثم اجري فحص التلازن بحبيبات اللاتكس المرتبطة بالأجسام المضادة للـمستضدين O157 وH7 وأعطت العزلات الثلاث نتيجة ايجابية مع كلا العدتين. شخصت العزلات باستعمال تقنية التفاعل التضاعفي المتعدد لسلسلة الدنا( Multiplex Polymerase Chain Reaction)( (MPCR للكشف عن وجود أوغياب أربعة أنواع من الجينات هي Stx1 و Stx2 و hlyA و eaeA المشفرة لعوامل ضراوة رئيسية لتشخيص بكتريا E.coliO157:H7 المعزولة وذلك بأستخدام بادئات نوعية تستهدف مواقع متخصصة للجينات الهدف المذكورة انفاً وفي تفاعل واحد ، وأظهرت النتائج وجود تباين في المحتوى الجيني بين عزلات بكتريا E.coliO157:H7 حيث احتوت احدى العزلات على الجينات الأربعة بينما احتوت العزلتان الاخريتان على ثلاثة جينات هي Stx2 و hlyA و eaeA} }