TY - JOUR ID - TI - Production and Partial Purification of Heat-Stable Enterotoxin (A) Produced by Enterotoxigenic Escherichia coli انتاج وتنقية جزئية للسم المعوي الثابت حراريا (أ) المنتج من قبل بكتريا ايشيريشيا القولون السمية المعوية AU - Maha F. Al-Taee مها فخري الطائي AU - Zaid K. Kamona زيد كاظم كمونة AU - Rajiha I. Al-Nuaimy راجحة اسماعيل النعيمي PY - 2010 VL - 34 IS - 1 SP - 122 EP - 130 JO - The Iraqi Journal of Veterinary Medicine المجلة الطبية البيطرية العراقية SN - 16095693 24107409 AB - A total of (25) stool samples were collected from children and adults (2- 4) years old suffering from diarrhea to isolate E. coli strains that produce heat-stable enterotoxin a (STa), and after performing microscopic examination, cultural characterization and biochemical identification only (11) isolates showed positive E. coli. STa activity was estimated by using suckling mouse assay (SMA) and from these (11) isolates only (5) showed STa activity and the one with the highest STa activity was selected for large scale production of STa, which was followed by partial purification using ion-exchange chromatography (normal phase) using DEAE sephadex A-50 column. After purification and determination of protein concentration by using the standard curve of bovine serum albumin, the concentration of toxin-protein was estimated as (1.08) mg/ml. The specific activity varied from (350) U/mg protein at the first step of purification to (2366.6) U/mg protein at the final step, while the final purification of the toxin was about (6.76) fold and with a yield of (18.25) %.

جمعت (25) عينة خروج من مرضى يعانون من الاسهال لغرض عزل عزلات ايشيريشيا القولون المنتجة لــ (STa) , وبعد اجراء الفحص المجهري و التشخيص الزرعي و الفحوصات البايوكيميائية, شخصت (11) عزلة ايجابيا على انها ايشيريشيا القولون.وقدرت فعالية الــ (STa) عن طريق استخدام فحص الفئران الرضع (suckling mouse assay), وبعد استخدام هذا الفحص فقط (5) عزلات اظهرت فعالية سمية و من هذه العزلات تم انتخاب العزلة التي اظهرت اعلى فعالية من اجل استخدامها للانتاج المعياري الواسع لــ (STa) والذي اتبع بالتنقية الجزئية عن طريق استخدام كروماتوغرافيا التبادل الايوني (ion-exchange chromatography). في نهاية التنقية وبعد حساب تركيز البروتين, تم الحصول على 0.108 ملغم/ مل بروتين, وبفعالية نوعية قد تراوحت من 350 وحدة/ملغم بروتين في بداية التنقية الى 2366.6 وحدة/ملغم بروتين في الخطوة النهائية لعملية التنقية , اما عدد مرات التنقية للسم فكانت 6.76 مع حصيلة بروتينية مقدارها 18.25%. ER -