@Article{, title={SIMPLE METHOD FOR PURIFICATION OF WHEAT GERM LECTIN BY AFFINITY CHROMATOGRAPHY طريقة مبسطة لتنقية لكتين جنين الحنطة بكروموتوكرافيا الالفة}, author={Ali A.Taha علي عبد الرحمن طه and Mohamed O. Muhynddin محمد عمر محى الدين and Inas M. AI-Aubadi ايناس مظفر العبادي}, journal={Iraqi Journal of Agricultural Sciences مجلة العلوم الزراعية العراقية}, volume={39}, number={2}, pages={44-53}, year={2008}, abstract={Because of various application of purified lectin ,the aim of this study was to extract it from wheat germ which is one of the byproducts from wheat processing. The extraction steps including fat elimination from wheat germ by heptan fellowed by lectin extraction by 0.05 M hydrochloric acid solution in ratio (1: 10)(w/v) for one hour at 25C . The crud extract was subjected to different purification steps including concentration by ultrafiltration by this step it was possible to eliminate high portion of low molecular wight compounds which is below 10000 dalton. The difiltration was done to concentrated the sample by 0.01 M Tris-HCL, pH 8.5 .The purification folds and yeild of the lectin were 5.71 and 98.34% respectively. Ion-exchange chromatography by bachwise procedure using Diethel amino ethel cellulose (DEAE¬Cellulose) then affinity chromatography by chitin column, where the chitin itself was prepared from outer shells of shrimp ,we obtained about 40 g chitin which is equel to 20% chitin from the dry shells then the chitin was used as a matrix and a ligand in affinity chromatography for purification of the lectin after this step the purification fold was 20 and yeild of the lectin was 19.51 % . The lectin was purified to homogeneity as indicated by presence of one band in polyacrylamide gel electrophoresis under denaturing conditions in presence and absence of the reducing agent 2-mercaptoethanol .The amount of lectin is about 60mg /1000 gm of wheat germ when using the steps which indicated in this study .

‏نظرا للاستخدامات المتعددة للكتين النقي فقد هدفت هذه الدراسة إلى استخلاصه من جنين الحنطة , وهو أحد النواتج العرضية لتصنيع الطحين .،وشملت خطوات الاستخلاص إزالة الدهن من جنين الحنطة باستخدام الهبتان تلا ه استخلاص اللكتين بمحلول حامض الهيدروكلوريك بتركيز 0.05 ‏ مولار بنسبة (1 :10 ) (وزن/حجم) مدة ساعة واحدة بدرجة حرارة 25 ‏م. واخضع المستخلص الخام لخطوات تنقية عدة تمثلت بتركيزه بالترشيح الفائق لازالة نسبة كبيرة من المركبات ذات الاوزان الجزيئية التي تقل عن 10000 ‏ دالتون. وأجريت عملية غسل وترشيح متكررة Diafiltration للاطموذج المركز باستخدام محلول Tris-HCI‏ الدارئ بتركيز0.01 ‏مولار ذي الأس الهيدروجيني8.5 ‏وحققت هذه الخطوة تنقية جزئية للكتين بلغت 5.71 ‏مرة وبحصيلة مقدارها 98.34 % . تلتها خطوة كروماتوكرافيا التبادل الأيوني _باسلوب الوجبة باستخدام المبادل شنائي اثيل امينو اثيل سيليلوز DEAE- Cellulose وبلغت عدد مرات التنقية لجزء الغسل 7.5 ‏مرة في حين بلغت حصيلة اللكتين 80 ‏% و أخيرا جرت خطوة تفتية اللكتين باستخدام كروماتوكرافيا الألفة بعمود الكايتين والذي حضر مختبريا من الهيكل الخارجي للروبيان وأسفرت عملية التحضير عن الحصول على ما يقارب من 40 ‏غم كايتين أي ما يعادل20 % ‏كايتين من وزن القشور الجافة واستخدم الكايتين المحضر بوصفه شبكة للفصل وذراعا في كروماتوكرافيا الألفة لتنقية اللكتين. وبلغت عدد مرات التنقية بعد هذه الخطوة 20 ‏ مرة وبحصيلة متدارها 19.51 ‏% ‏. وقد تبين ان اللكتين المنقى يتميز بنقاوة عالية حد التجانس وذلك بظهوره حزمة واحدة عند ترحيله كهربائيا في هلام متعدد الاكريلامايد بظروف ماسخة بوجود المادة المختزلة 2 -ميركابتوايثانول وغيابها. وباتباع الخطوات المذكورة في هذه الدراسة بلغت كمية اللكتين المحصل عليها 60 ‏ ملغم/ 1000 ‏غم من جنين الحنطة .} }