@Article{, title={PRODUCTION AND PURIFICATION OF PLASMID VECTOR PUB110 IN TRANSFORMED BACILLUS SUBTILIS BACTERIA إنتاج وتنقية ناقل الإستنسال pUB110 في بكتريا Bacillus subtilis المتحولة}, author={Khlood A. Al- Khafaji}, journal={Iraqi Journal of Biotechnology المجلة العراقية للتقانات الحياتية}, volume={11}, number={2}, pages={141-150}, year={2012}, abstract={Ninety percent of B. subtilis protoplast could obtained after 30 minute from treatment of the bacteria with both Ethylene diamine tetra acetic acid (EDTA) and lysozyme enzyme. Protoplast transformed with the plasmid vector pUB110 had efficiency 104 cell/mg of DNA . Kanamycin resistant cell was gained after culturing transformed bacteria onto regeneration medium which containing kanamycin antibiotic. Three different methods were used for DNA extraction from transformed B. subtilis and the plasmid vector pUB110 could detected from the three methods. Salting out procedure gave the highest DNA yield with chromosomal DNA smear in comparison with the other two procedures. Furthermore, gel electrophoresis for DNA extracted by CTAB method showed high purity DNA extract in comparison with other extraction methods.

تم الحصول على خلايا منزوعة الجدران لبكتريا النوعB.Subtilis وبكفاءة 90% بعد حضن لمدة نصف ساعة بإستعمال Ethylen ediamine tetra acetic acid (EDTA) والإنزيم الحال Lysozyme. وأمكن تحويل الخلايا المنزوعة الجدران بناقل الكلونةpUB110 وبكفاءة تحول 104خلية/ملغرام من الدنا لناقل الكلونة ونتج عنه الحصول على خلايا مقاومة للمضاد الحيوي الكانامايسين عندما زرعت البكتريا المتحولة على وسط إعادة التكوين الحاوي على مضاد الكانامايسين. أًستعملت ثلاثة طرائق لإستخلاص الدنا من الخلايا المتحولة وأمكن التحري عن وجود ناقل الكلونة في مُستخلص الطرق الثلاث وقد اعطت طريقة الترسيب بالملح ناتجا كبيرا من الدنا مع مسحة واسعة من الدنا الكروموسومي مقارنة بالطريقتين الأخريتين بينما أظهر الترحيل الكهربائي لمُستخلص الدنا بطريقة CTAB نقاوة المُستخلص مقارنة مع المُستخلصات الأُخرى.} }