@Article{, title={Partial Separation and Some Kinetic Studies of Glutathione S-transferase (GST) in Amniotic fluid فصل جزئي ودراسة بعض الصفات الحركية لإنزيم كلوتاثايون-S ترانسفيريز من السائل الامنيوني}, author={Tareq Y. Ahmad طارق يونس احمد and Luay A. Al-Helaly لؤي عبد الهلالي and Farah Y. Mla-Alw فرح يونس ملا علو}, journal={Tikrit Journal of Pure Science مجلة تكريت للعلوم الصرفة}, volume={17}, number={3}, pages={142-152}, year={2012}, abstract={The research includes the isolation of glutathione S-transferase from the amniotic fluid of normal pregnancy at 40 week, studying the factors effecting the activity of the enzyme and determination of its molecular weight. Four bands components had been isolated by gel filtration chromatography from the proteinous supernatant produced by ammonium sulfate saturation after dialysis. It was found that the third peak had a high activity for the enzyme. The apparent molecular weight of the isolated enzyme using gel filtration chromatography was (22787) Dalton.The results also showed that the optimum conditions of glutathione S-transferrase were obtained at (40µg/ml) of enzyme concentration using (13.5 mmol/l) of 1-chloro-2,4-dinitrobenzene (CDNB) as a substrate, phosphate buffer (0.09 mol/l) as a buffer at pH (6.4) for (14) minutes at (25C). Using lineweaver–Burk plot, the values of maximum velocity (Vmax) and Michaelis constant (Km) were (0.76 µmol/ min) and (13.3 mmol/l) respectively. The study showed the effect of some inhibitors on the enzyme activity. Benzyl chloride possessed a noncompetitive inhibition for the enzyme at a concentration of (30 mmol/l).

عزل إنزيم كلوتاثايون S- ترانسفيريز من السائل الامنيوني لامرأة حامل في الأسبوع الـ 40 من الحمل ودراسة بعض العوامل المؤثرة على فعالية الإنزيم فضلا عن تحديد وزنه الجزيئي. إذ تم فصل أربع حزم رئيسة بتقنية الترشيح الهلامي للراشح البروتيني الناتج من الترسيب بكبريتات الامونيوم بعد عملية الفرز الغشائي (الديلزة)، وأظهرت الحزمة الثالثة فعالية عالية للإنزيم، بعدها قدر الوزن الجزيئي للإنزيم باستخدام تقنية الترشيح الهلامي التي كانت بحدود 22787 دالتون.وكما تم دراسة الظروف المثلى لقياس فعالية الإنزيم المنقى من السائل الامنيوني وأظهرت النتائج ان الظروف المثلى لعمل الإنزيم عند تركيز 40 مايكروغرام/مل باستخدام المحلول المنظم الفوسفات بتركيز0.09 مول/لتر عند أس هيدروجيني 6.4 وزمن التفاعل 14 دقيقة ودرجة حرارة 25°م و13.5 ملي مول/لتر من مادة الأساس 1-كلورو ثنائي نايترو بنزين (CDNB) وباستخدام رسم لاين ويفر–برك تم إيجاد قيمة السرعة القصوى (Vmax) وثابت مكيلس (Km) وكانت مساوية لـ 0.76 مايكرومول/دقيقة و13.3 ملي مول/لتر على التوالي. كذلك تمت دراسة تأثير بعض المثبطات على فعالية الإنزيم، وبينت النتائج أن كلوريد البنزيل كان من نوع التثبيط غير التنافسي عند تركيز 30 ملي مول /لتر.} }