TY - JOUR ID - TI - Cytotoxic effect of the crude extracts of the locally Isolate Lactococcus lactis on AMN-3 tumor cell line التأثير السمي للمستخلصات الخام للعزلة المحلية Lactococcus lactis على الخط الخلوي السرطاني AMN-3 AU - Ali Abbdul-rahman T. Al-Shekhly علي عبد الرحمن طه الشيخلي AU - Moyassar B. H. Al-Shaibani ميسر باسل هادي الشيباني AU - Mohammad R. Abdul-Majeed محمد رفيق عبد المجيد PY - 2013 VL - 7 IS - 2 SP - 31 EP - 43 JO - Journal of Biotechnology Research Center مجلة مركز بحوث التقنيات الاحيائية SN - 18151140 27081370 AB - This project was conducted to study the activity of secondary metabolites produced by one of a human microflora which is Lactococcus lactis on AMN-3 tumour cell line in vitro. Twenty samples of dairy products (bucolic sour yoghurts, pasteurized milk and raw milk) were collected; nine isolates of Lactococccus were isolated by propagating in MRS broth medium followed by subjecting the isolates to microscopic, cultural, physiological and biochemical tests. The results showed the presence of four isolates belonged to the genus Lactococcus sp. lactis. the isolates were grown in three broth production media, which were MRS, VVM and BHI at 37ºC for 6 h. followed by extraction of crude extracts using ammonium sulphate saturation ratio which was 80% for each medium confidentially. The overall result was three crude extracts (one from each medium), followed by estimation the concentrations of extracted proteins depending on standard curve of bovine serum albumin. The cytotoxic activity of different concentrations for each crude extract was studied on AMN-3 tumour cell line for three incubation periods (24,48,72) hrs in addition to normal rabbit embryo fibroblast (REF) cell line for 72 hr only. The result illustrated a clear cytotoxic activity of these crude extracts with high significances on this tumour cell line during the three incubation periods, suggesting that the cytotoxic effect of these crude extracts is a dose and time dependent, but on REF cell line, there is no significant effect of these crude extracts was reported, suggesting also, that may be the active compound of L. lactis possess some specificity in cytotoxicity on cancer cells but not on normal cells.

صُمّمت هذه الدراسة لبيان فعالية مركبات الأيض الثانوي المنتجة بواسطة أحد النبيتات الطبيعية في الجسم البشري وهي مكورات حامض اللاكتيك Lactococcus lactis بشكلها الخام بالاضافة الى البروتينات المستخلصة من جدارها الخلوي وتأثيرها على نمو الخلايا السرطانية خارج الجسم الحي وقد تضمنت الدراسة ما يأتي: جُمعت عشرون عينة غذائية شملت منتجات الألبان (اللبن الرائب الريفي والحليب المبستر والحليب الخام)، وعزلت منها تسع عزلات تعود للجنس Lactococcus تم عزلها باستخدام الوسط الزرعي MRS السائل ثم خضعت العزلات للفحوصات المجهرية والزرعية فضلا عن الاختبارات الكيموحيوية . أظهرت النتائج وجود أربع عزلات تعود للجنس Lactococcus النوع lactis. تم تنمية البكتيريا في ثلاثة أوساط زرعية إنتاجية سائلة وهي (VVM, MRS وBHI) عند درجة حرارة 37م لمدة 6 ساعات ومن ثم استخلاص المستخلصات الخام باستخدام كبريتات الأمونيوم وبنسبة تشبع وهي 80% لكل وسط على حدة. كانت المحصلة النهائية ثلاث مستخلصات خام ( مستخلص واحد من كل وسط). وتقدير كميات البروتين المستخلصة بالمقارنة مع المنحني القياس لألبومين المصل البقري. بعدها تم اختبار الفعالية السمية الخلوية لتراكيز مختلفة لكل مستخلص خام من مستخلصات مكورات حامض اللاكتيك على الخط الخلوي السرطاني AMN-3 وبثلاث فترات حضن (24، 48 ،72) ساعة بالاضافة الى اختبار سمية هذه المستخلصات الخام على الخط الخلوي الطبيعي لجنين الأرنب REF ولفترة حضن واحدة فقط وهي ٧٢ساعة. كانت النتيجة وجود تأثير سمي واضح، وبمعنوية عالية لتلك المستخلصات على نمو الخلايا السرطانية وخلال فترات الحضن الثلاث، وقد لوحظ أن شدة السمية تزداد بزيادة التركيز وفترة الحضن لذا فان التأثير السمي لتلك المستخلصات الخام لمكورات حامض اللاكتيك يعتمد على التركيز وفترة الحضن، في حين لم يكن هناك تأثير واضح وذو معنوية لنفس المستخلصات في نمو الخلايا الطبيعية REF لذا قد يكون للمركبات الأيضية لمكورات حامض اللاكتيك Lactococcus lactis بعض التخصص في التأثير السمي على نمو الخلايا السرطانية دون الطبيعية . ER -