TY - JOUR ID - TI - Beginning Steps in Construction of a Plasmid Free from Antibiotic Resistant Genes for DNA Vaccine الخطوات الاولية في بناء البلازميدات الخالية من جينات المقاومة للمضادات الحياتية للقاح الحمض النووي الرايبوزي AU - Evan L. Khaleef ايفان لطيف خليف AU - Farhad Abdukarim فرهاد عبد الكريم PY - 2013 VL - 11 IS - 1 SP - 69 EP - 78 JO - Al- Anbar Medical Journal مجلة الأنبار الطبية SN - 27066207 26643154 AB - Objectives: Bacterial cell cultures containing antibiotic resistant genes represent a problem of growing concern. Spreading of bacterial genes encoding antibiotics resistance provides an environmental hazard, which is worsened by the release of antibiotics from the fermentation facility as well. This study has been undertaken to construct ,a new plasmid free from antibiotics to be used for DNA vaccine in the next future.Subject and Methods: DNA vaccine has initiated a new era of vaccine research. Restriction enzyme and T4 DNA ligation from NEB were used for Restriction/Ligation of DNA and two PCR methods were used in this study long and short PCR. All plasmid and PCR products were analysed on 1% agarose gel. Results: A plasmid free from antibiotic resistant genes was constructed from pBR322 by delete the bla gene by long PCR and tetr gene was deleted by direct repeat homologous recombination the final constructed plasmid is confirmed by gel electrophoresis in compare with two control, origin pBR322 and pBR322-∆amp in addition to specific lambda DNA marker.Conclusion: It is concluded that the vector used as DNA vaccine which be free from antibiotic can play the same role as those contain antibiotic and eventually prevent horizontal separation of antibiotic resistant gene

أن وجود الجينات المقاومة للمضادات الحيوية في الخلايا البكتيرية تعتبر من المشاكل المثيرة للاهتمام. حيث ان انتشار هذه الجينات في المحيط البيئي يؤدي الى نشر المقاومة للمضادات الحيوية لذلك كان من الضروري الاهتمام بموضوع تقليل استخدام الجينات المقاومة للمضادات الحيوية في مجال الهندسة الوراثية والتقانة الاحيائية. لقد قمنا في هذه الدراسة ببناء الاسس الضرورية لإنتاج بلازميد لا يحتوي على اي جين مقاوم لأي مضاد حيوي. استندت الدراسة في مجال بحثها على بلازميد ال pBR 322 الحاوي علي جينين مقاومين احدهما مسوؤل عن مقاومة التتراسايكلين والاخر مسؤول عن مقاومة البنسلين. لقد تم بنجاح ازالة الجينين من البلازميد وتشكيل بلازميد جديد لا يحتوي على اي جين مقاوم ER -