@Article{, title={Purification and characterization of Hemolysin produced by local isolates of Vibrio cholera تنقية وتوصيف الهيمولايسين المنتج من عزلة محلية لبكتريا الهيضة}, author={Mohammed Ibrahem Nader محمد إبراهيم نادر and Amer Hani Razaq AL.Shammary عامر هاني رزاق الشمري and Muthanna Abdulkhader Al-Mahdawi مثنى عبد ألقادر صالح المهداوي}, journal={Academic Science Journal مجلة العلوم الاكاديمية}, volume={10}, number={1}, pages={74-83}, year={2014}, abstract={The Hemolysin was Extracted from Vibrio cholera cultured on Brain Heart infusion by cold centrifugation 5000 r/min for 15 min at 4°C, and purified by several steps, including precipitation with 75% saturation ammonium sulphate, ion exchange chromatography using DEAE-cellulose and gel filtration on Sephadex G-100 column. The obtained purification fold and recovery were 24.26 unit /ml and 32.47% respectively. The molecular weight of the enzyme is about 19490 Dalton as determined by gel filtration. The optimum pH for activity and stability was 6 and 6-8 respectively. The enzyme retained its original activity when incubated at 20-45oC for 15 min, the activity of the enzyme decreased after enzyme incubation at 45oC. The maximum enzyme activity observed at 30oC

استخلص الهيمولايسين من مزروع بكتريا الكوليرا المنماة على وسط نقيع القلب والدماغ باستخدام الطرد المركزي المبرد (4°م) بسرعة 5000 دورة /دقيقة لمدة 15 دقيقة، ونقي الهيمولايسين بخطوات عدة شملت الترسيب بكبريتات الأمونيوم بنسبة إشباع % 75 و كروموتوغرافيا التبادل ألايوني باستخدام المبادل ألايوني DEAE-Cellulose والترشيح الهلامي باستخدام هلام Sephadex G-100، بلغت عدد مرات التنقية 24.26 و مقدار الحصيلة الهيمولايسينية 32.47%. كان الوزن الجزيئي للإنزيم المنقى 19490 دالتون. الرقم الهيدروجيني الامثل لفعالية وثبات الهيمولايسين كان 6 و 6-8 على التوالي. أحتفظ الهيمولايسين بكامل فعاليتـه عند حضنه لمدة 15 دقيقة بمدى من درجات الحرارة بين 20-45 °م ، وانخفضت الفعالية الهيمولايسينيه بعد الحضن عند درجة حرارة 45 °م، كما لوحـظ أن أقصى فعالية للأنزيم كـانت عند درجة 30 °م} }