TY - JOUR ID - TI - Partial Purification and Some Kinetic studies of Glutathione Peroxidase (GPx) in Normal Human Plasma and Comparing with Primary Infertility Female تنقية جزئية ودراسة بعض الصفات الحركية لأنزيم كلوتاثايون بيروكسيديز من بلازما انثى سليمة ومقارنتها بعقيمة من النوع الأولي AU - Luay A. Al-Helaly لؤي عبد الهلالي AU - Obeda A. Al-kado عبيدة عبد الخالق القدو PY - 2013 VL - 18 IS - 3 SP - 36 EP - 45 JO - Tikrit Journal of Pure Science مجلة تكريت للعلوم الصرفة SN - 18131662 24151726 AB - This study attempts to isolate the glutathione peroxidase(GPx) from normal human plasma compared to infertility female. Three proteinous components had been isolated by gel filtration chromatography from the precipitate produced by ammonium sulfate. It was found that only the first peak had a high activity for GPx. The apparent molecular weight of the isolated GPx using gel filtration (Sephadex G-100) was (88131) dalton respectively.Maximum activity for GPx was obtained using (2.5) mmol/l of glutathione (GSH) as substrate, phosphate buffer (0.3 M/l) as a buffer at pH (6.5) for (14) minutes in incubation at (40)C. Using Line Weaver–Burk plot, the values of maximum velocity (Vmax) and Michaelis constant (Km) were (1.56 µmol/ min) and (1.1 mmol/l) respectively. The study showed the effect of some inhibitors on the enzyme activity. Paracetamol and copper sulfate possessed a noncompetitive inhibition while zinc acetate showed a competitive inhibition .

الدراسة حاولت عزل أنزيم كلوتاثايون بيروكسيديز من البلازما أنثى سليمة ومقارنتها مع عقيمة من النوع الأولي. إذ تم فصل ثلاث حزم رئيسة من البروتينات بتقنية الترشيح الهلامي للراسب ألبروتيني الناتج من الترسيب بـ كبريتات الامونيوم، وأظهرت الحزمة الأولى فعالية عالية لأنزيم كلوتاثايون بيروكسيديز. قدر الوزن الجزيئي للأنزيم باستخدام تقنية الترشيح الهلامي باستخدام سفيدكس نوع G-100 ، ووجد أنه بحدود (88131) دالتون على التوالي.تم أيجاد الظروف المثالية لفعالية أنزيم كلوتاثايون بيروكسيديز وكانت كالاتي: استخدام(2.5) ملي مول/لتر من مادة (Glutathione (GSH)) كمادة أساس و(0.3) مول/لتر من المحلول المنظم (Phosphate buffer) عند أس هيدروجيني (6.5) ودرجة حرارة تحضين(40) °م بفترة زمنية مقدارها (14) دقيقة.وباستخدام رسم لاين ويفر– برك تم ايجاد قيمة السرعة القصوى (Vmax) وثابت مكيلس (Km) والتي كانت مساوية لـ 1.56 مايكرومول/دقيقة و1.1 ملي مول/لتر على التوالي. كذلك تمت دراسة تأثير عدد من المثبطات على فعالية الإنزيم ودراسة تأثير عدد من الأدوية على فعالية الإنزيم وبينت النتائج أن كبريتات النحاس والباراسيتامول كانا من نوع التثبيط غير التنافسي وخلات الخارصين كان من نوع التثبيط التنافسي. ER -