@Article{, title={STUDIES ON COUMARIN COMPOUNDS ISOLATED FROM MELILOTUS INDICA AND ITS EFFECT ON SOME PATHOGENIC BACTERIA AND HELA CELLLINE دراسة تأثير مركبات الكومارين المعزولة من نبات الحندقوق Melilotus indicaتجاه بعض البكتريا المرضية وخط الخلايا السرطانيةHeLa cell}, author={فيصل كاظم مطشر1}, journal={Iraqi Journal of Biotechnology المجلة العراقية للتقانات الحياتية}, volume={8}, number={1}, pages={386-399}, year={2009}, abstract={The active compounds in crude extracts have been separated by Liquid –Liquid extraction using diethyl ether. The separated compounds from two phases were studied by TLC. The ether phase of extracts prepared by solvents were contained compounds with Rf values (0.65,0.5,0.4,0.27, 0.2), but the aqueous phase was free of any compound belong to coumarins, while the ether phase of extracts prepared by buffer solutions were contained compounds with Rf values (0.65 and 0.4) , but the aqueous phase was free of any compound belong to coumarins. The concentrations of coumarin in crude extracts have been determined, the greater concentration were 1.501 and 2.734 mg/gm plant in acetate buffer extracts for the first and second times, respectively, and lowest concentration were determined in tris buffer extracts.The identified studies by high performance liquid chromatography (HPLC) was revealed the presence of one peak with retention time(RT) 8.53min. which is the equal to RT of standard coumarin. The antibacterial activity of acetate buffer, ethanol 80% extracts and purified coumarin have been determined against pathogenic bacteria by determination of minimal inhibitory concentration (MIC) and minimal bactericidal concentration (MBC). The MIC range of acetate extract were 16.2-19.7mg/ml against pathogenic isolates while the MIC range of ethanol 80% extract were 3.3-5.4mg/ml.Ps. aeruginosa was distinguished as most sensitive against extracts. The MIC values of purified coumarin were 0.62-1.37mg/ml and the most sensitive isolate against compound was E.coli. Cytotoxicity of standard and purified coumarin were tested against cell line (HeLa cell) by using four concentrations (25,50,100 and 200μg/ml) for exposure time 48hrs. The results revealed that standard and purified coumarin had cytotoxic effect with increasing effectiveness with concentration under our study.

فُصلت المركبات الفعالة (الكومارينات) في المستخلصات الخام لنبات الحندقوق Melilotus indicaالتي جمعت بموعدين مختلفين بوساطة الفصل بالتجزئة باستخدام الايثر ثنائي الاثيل ودرست المركبات المفصولة على صفائح هلام السيليكا، إذ احتوت طبقة الايثر الناتجة من المستخلصات المحضرة بوساطة المذيبات (الماء المقطر والايثانول 80% والكلوروفورم) مركبات فعالة بقيم سريان نسبي (0.65 و0.5 و0.4 و0.27 و0.2)، وقد خلت الطبقة المائية من أي من مركبات الكومارينات، بينما احتوت طبقة الايثر الناتجة من المستخلصات المحضرة بوساطة المحاليل الدارئة (دارئ الخلات ودارئ الفوسفات ودارئ الترس) مركبات فعالة بقيم سريان نسبي (0.65 و 0.4). حدد تركيز مركب الكومارين في المستخلصات الخام وكان أعلى تركيز1.501 و 2.734 ملغم/غم نبات في مستخلص دارئ الخلات للموعد الأول والثاني على التوالي، وانخفضت في مستخلص دارئ الترس في كلا الموعدين. أكدت الدراسة التشخيصية بوساطة كروموتوغرافيا السائل ذي الإداء العالي ظهور قمة واحدة بزمن احتجاز مقداره 8.53 دقيقة وهي مساوية لزمن احتجاز مركب الكومارين القياسي. حددت الفعالية التثبيطية لمستخلص دارئ الخلات ومستخلص الايثانول 80% (للموعد الثاني) ومركب الكومارين المنقى تجاه ستة عزلات بكتيرية مرضية عـن طريق تحديد التركيز المثبط الأدنى (MIC) والتركيز القاتل الأدنى (MBC)، إذ حقق مستخلص دارئ الخلات قيم MIC تراوحت بين 19.7-16.2 ملغم/مليلتر، بينما حقق مستخلص الايثانول 80% قيم MIC5.4-3.3 ملغم/مليلتر، وقد كانت بكتريا Pseudomonas aeruginosaأكثر الأنواع تأثراً، أما قيمةMIC لمركب الكومارين المنقى فقد تراوحت بين 1.37-0.62 ملغم/مليلتر وكانت بكتريا Escherichia coli أكثر الأنواع تأثراً بالمركب. أختبرت السمية الخلوية لمركب الكومارين المنقى والقياسي تجاه خط الخلايا السرطاني نوع HeLa Cell بأربعة تراكيز هي 200،100,50،25.} }