TY - JOUR ID - TI - Study of Some Physical and Chemical Properties of Staphylolysin Enzyme purified from Pseudomonas aeruginosa دراسة بعض الخصائص الفيزيائية والكيميائية لأنزيم الستافيلولايسين Staphylolysin المنقى من بكترياالـ Pseudomonas aeruginosa AU - May T. Flaih مي طالب فليح AU - Shayma'a S. Najim شيماء سهيل نجم PY - 2014 VL - 11 IS - 2 عدد خاص بالمؤتمر النسوي الثاني SP - 819 EP - 828 JO - Baghdad Science Journal مجلة بغداد للعلوم SN - 20788665 24117986 AB - Some of the characters of the Staphylolysin A and D enzymes purified from Pseudomonas aeruginosa P16 and P5 respectively were studied, the molecular weights of Staphylolysin A and D were 20.417 kilo dalton and 23.988 kilo Dalton respectively by SDS- polyacryl amide gel electrophoresis. The optimum pH for staphylolysin A activity was found to be 8 which gives higher activity reaches 150 unit/ml, and for enzyme stability was 7.5-8.5 in which the enzyme nearly retained its full activity, while it was 9.5 for staphylolysin D that gives higher activity of 16 unit/ml,and 8.5-9.5 for enzyme stability in which the enzyme nearly retained its full activity, Maximum activity of two enzymes was obtained at 40C in which the specific activity for staphylolysin A and D were 140 and 16.4 unit/ml, and the two enzymes remained approximately without change at 25-40C for one hour. When the effects of some materials on Staphylolysin A&D activity were studied, the results showed that both sodium chloride & potassium chloride at 1 & 5 mM had the activator effect on enzymatic activity compared with its control where the staphylolysin A and D retained 105% ,108% and 102%, 104% of their activity respectively when treated with sodium chloride, while they retained 110%, 114% and 133%, 118% of their activity respectively when treated with potassium chloride. The enzymatic activity for both enzymes were inhibited when treated with ferric , mercury and zinc chloride at variable ratios, Staphylolysin A kept 73% and 7% of its initial activity respectively when treated with 5mM of ferric chloride and mercury chloride respectively and it kept only 9% of its initial activity when treated with 0.1mM Zinc chloride . Staphylolysin D kept 45% and 13% of it is initial activity respectively when treated with 5mM of ferric chloride and mercury chloride respectively and it kept only 23% of its initial activity when treated with 0.1mM Zinc chloride while enzymatic activity for both enzymes were not affected when treated with EDTA at l0mM and phenyl methyl sulphonyl fluoride (PMSF) at 0.4mM.These results referred to that Staphylolysin A and D are Zn -metallo endopeptidase .

درست بعض خصائص انزيم الستافيلولايسينStaphylolysin )) A وD المنقى من بكترياP5, P16 Pseudomonas aeruginosa على التوالي فكان الوزن الجزيئي 20,417 كيلو دالتون و 23,988 كيلودالتون للستافيلولايسين D,A على التوالي عند تقديرهما بطريقة الترحيل الكهربائي في هلام SDS- PAGE. لوحظ ان الرقم الهيدروجيني الامثل لفعالية الستافيلولايسين A هو 8 اذا اعطى فعالية بلغت 150 وحدة / مل, ولثبات الانزيم 7.5-8.5 اذ احتفظ الانزيم بكامل فعاليته تقريبا, فيما كان الرقم الهيدروجيني الامثل لفعالية الستافيلولايسين D هو 9.5 إذ اعطى اعلى فعالية بلغت 16 وحدة /مل، ولثبات الانزيم 9.5-8.5 إذ احتفظ الانزيم بكامل فعاليته تقريباً، وظهرت اقصى فعالية للانزيمين عند درجة حرارة 40م اذ بلغت الفعالية النوعية للستافيلولايسن A 140 وحدة / مل وللستافيلولايسين 16.4 D وحدة/ مل , واحتفظ كلا الانزيمين بكامل فعاليتهما تقريبا عند حضنها بدرجة حرارة 25-40 م لمدة ساعة . عند دراسة تاثير بعض المواد في الفعالية الانزيمية الستافيلولايسين Staphylolysin )) D,A كان لكلوريد الصوديوم وكلوريد البوتاسيوم بتركيز1و5 ملي مولار تأثير منشط للفعالية الانزيمية قياسا بالسيطرة اذ احتفظ انزيم الستافيلولايسينD,A بـــ %105، %108 و 102%، 104% من فعاليتهما على التوالي عند معاملتهما بكلوريد الصوديوم بينما احتفظ كلا الانزيمين بـ 110%%114 , و133% ،118% من فعاليتهما على التوالي عند معاملتهما بكلوريد البوتاسيوم. ثبطت الفعالية الانزيمية لكلا الانزيمين عند معاملتهما بكلوريدات الحديد والزئبق والخارصين وبنسب متفاوتة، إذ احتفظ انزيم الستافيلولايسينA بـــ 73% و 7% من فعاليته الابتدائية على التوالي عند معاملته بـ 5 ملي مولار من كلوريد الحديد والزئبق على التوالي، و9% فقط من فعاليته عند معاملته بـ 0.1 ملي مولار من كلوريد الخارصين, فيما احتفظ انزيم الستافيلولايسين D بــــ 45% و 13% من فعاليته فقط عند معاملته بــ 5 ملي مولار من كلوريد الحديد والزئبق على التوالي، 23% فقط من فعاليته عند معاملته بـــ 0.1 ملي مولار من كلوريد الخارصين , بينما احتفظ كلا الانزيمين بكامل فعاليتهما عند المعاملة بمادة EDTA بتركيز 10 ملي مولار , وفينيل مثيل سلفونيل فلورايد (PMSF ) بتركيز 0.4 ملي مولار .هذه النتائج تشير الى ان انزيمي الستافيلولايسين من الانزيمات المعدنية (Zn -metallo endopeptidase) . ER -