TY - JOUR ID - TI - Purification and Characterization of Protease extracted from Bacillus licheniformis (B1) تنقية وخصائص انزيم البروتييز من بكترياBacillus licheniformis B1 AU - Haider Jawad Kadhim حيدر جواد كاظم AU - Sanaa Burhan Aldeen سناء برهان الدين PY - 2014 VL - 6 IS - 2 SP - 1 EP - 13 JO - JOURNAL OF MADENAT ALELEM COLLEGE مجلة كلية مدينة العلم الجامعة SN - 20732295 26645521 AB - Protease was purified by two steps included precipitation with 70% saturation ammonium sulphate and ion exchange chromatography by (DEAE-Sephadex). The enzyme specific activity was 86.6 U/mg. and fold of purification was 2.72 with 45 % enzyme recovery. Characterization of enzyme showed that the optimum pH for enzyme activity and stability was 9.0 (86 U/ml). Maximum enzyme activity appeared at 50°C. (88U/ml.). The enzyme activity remained was 87% at 50°C for 30 min. Effect of some metal ions, reducing agents and chelating on purified protease was studied, the remaining activity was 110% when it incubated with 10 mM of Mn2+, whereas the remaining activity was 95% and 92% when enzyme incubated with 10mM of Ca2+ and Mg2+, respectively. There was little effect for 10 mM of PMSF on enzyme activity, whereas the activity declined to 18% when enzyme was treated with 10 mM of 10 mM EDTA.

نقي الانزيم بخطوتين تضمنت الترسيب بكبريتات الامونيوم بنسبة تشبع 70% ثم كروموتوغرافيا التبادل الايوني بأستخدام عمود DEAE-Sephadex ,وكانت الفعالية النوعية للانزيم المنقى (U/ml.86.6) و بعدد مرات تنقية 2.72 وبحصيلة انزيمية مقدارها 45%. تمت دراسة توصيف الانزيم المنقى, وأظهرت النتائج بان افضل فعالية انزيمية وثباتية كانت عند الرقم الهيدروجيني 9 (86U/ml.), واظهرت اقصى فعالية للانزيم عند درجة حرارة 50.م° (88U/ml.) واحتفظ الانزيم بـ(87%) من فعاليته عند نفس درجة الحرارة لمدة 30 دقيقـــة. درس تأثير بعض الايونات الفلزية والمواد المختزلة والكلابية على فعالية الانزيم المنقى, ولوحظ زيادة في في فعالية الانزيم بحدود 110% عند حضنه مع ايون Mn2+ بتركيز 10 ملي مولار بينما كانت الفعالية المتبقية للانزيم عند حضنه مع نفس التركيز من ايوني Ca2+ و Mg2+هي 95% و 92% على التوالي, كما لوحظ تأثير قليل لمادة PMSF بتركيز 10 ملي مولار في حين انخفضت النسبة المؤية للفعالية الى 18% عند معاملة الانزيم بمادة EDTA بتركيز 10ملي مولار. ER -