Fulltext

Molecular Detection of Pseudomonas aeruginosa and Study the Effect of Fresh Garlic juice on Some Virulence Factors of this Bacteria.

التشخيص الجزيئي لبكتيريا الزوائف الزنجارية ودراسة تأثير مستخلص الثوم الطازج على بعض عومل الضراوة لهذه البكتيريا.

Hassan F. Lahig حسن فلاح لاحج --- Muthanna H. Hassan مثنى حامد حسن --- Luma A. Yassir لمى عامر ياسر

Journal of university of Anbar for Pure science مجلة جامعة الانبار للعلوم الصرفة
ISSN: ISSN: 19918941 Year: 2017 Volume: 11 Issue: 2 Pages: 9-17
Publisher: University of Anbar جامعة الانبار

Abstract

The present study included the collection of 169 samples from various clinical and environmental sources for investigation of existence of Pseudomonas aeruginosa in those sources, the clinical samples collected from some hospitals in Baghdad city and included 126 samples of wound, burns, cystic fibrosis, ear infections and urinary tract infections (35, 52,4, 22 and 13) samples respectively, while environmental samples were distributed by 25 samples from soil, and 18 samples from wastewater and some swamps. Samples were identified based on the morphological and microscopical characteristics of the colonies when they were culturing in a number of culture media as well as biochemical tests. The molecular detection was used to confirm diagnostic test for the isolates based on the 16SrRNA gene, as a detection gene, which has specific sequences for DNA of P.aeruginosa bacteria.The results of molecular detection showed that 51 isolates belong to target bacteria were distributed as 20 of burns, 9 isolates of wounds, 7 isolates of ear infection, 4 isolates of cystic fibrosis, 2 isolates of urinary tract infection, 5 isolates of soil and 4 isolates of water. The results of phenotypic detection of some virulence factors showed that 49 isolates with percent (95%) produced beta-hemolysis, while 46 isolates (90%) showed variance in the strength of pycocyanin production with a absorbance ranging from (0 to 0.52) at 690 nm, and 47 (92%) of isolates were producing protease enzyme, 44 (86%) of the isolates showed a differences in their ability to biofilm formation. As a result of the increased resistance of P.aeruginosa bacteria towards antibiotics, it is became a problem in the treatment of the infectious diseases caused by this bacteria therefore, the current study focused on the use of fresh garlic extract towards of some virulence factors because it being easy and commonly used. The results of the statistical analysis showed a significant difference when P-value (<0.05) in the production of some virulence factors, the isolates lost their ability to form biofilm, and decreased their ability to produce protease enzyme, and pyocyanin pigment, while did not affect the production of hemolycin.

تضمنت الدراسة الحالية جمع 169 عينة من مصادر سريرية وبيئية متنوعه لغرض التحري عن وجود بكتيريا P.aeruginosa في تلك المصادر ، حيث جمعت العينات السريرية من بعض مستشفيات بغداد وتضمنت 126 عينة من اخماج الحروق والجروج والتهاب الاذن والتهاب المجاري البولية والتليف الكيسي بواقع ( 52 , 35 , 22 , 13, 4) عينة على التوالي، اما العينات البيئية فقد توزعت بواقع 25 عينة من التربة و18 عينة من مياه الصرف الصحي وبعض المستنقعات. شُخصت العينات بالاعتماد على صفات المستعمرات المظهرية والمجهرية عند تنميتها في عدد من الاوساط الزرعية فضلا عن الفحوصات البايوكيميائية. تم استخدام التشخيص الجزيئي كتشخيص تأكيدي للعزلات على المستوى الجيني بالاعتماد على الجين التشخيصي 16SrRNAوالذي يحمل تتابعات خاصة ببكتيريا P.aeruginosa اظهرت نتائج النتشخيص النهائي ان 51 عزلة تعود للبكتيريا المستهدفة توزعت بواقع 20 من حالات الحروق و9 عزلات للجروح و7 عزلات لألتهاب الاذن و4 عزلات للتليف الكيسي وعزلتين تعود لألتهاب المجاري البولية و5 عزلات من التربة و 4 عزلات من المياه. وبينت نتائج الكشف عن بعض عوامل الضراوة بصورة مظهرية ان /5149 عزلة وبنسبة (95% ) كانت منتجة لأنزيم الهيمولايسين (beta-hemolysis) ، في حين كانت /5146 عزلة بنسبة (90% ) كانت منتجة لصبغة البايوسيانين بشده متباينة وبامتصاصية تراوحت بين صفر و0.52 عند طول موجي 690 نانومتر ، بينما كانت/5147 عزلة منتجة لأنزيم البروتييز الحال للبروتين وبنسبة (92%) ،كما أظهرت العزلات تبايناً في قابليتها على تكوين الغشاء الحيوي حيث كانت العزلات المكونة للغشاء 44 عزلة (86%). ونتيجة لأزدياد مقاومة بكتيريا P.aeruginosa للمضادات الحيوية اصبحت مشكلة تحيل دون معالجة الاخماج المتسببة عنها ، لذلك ركزت الدراسة الحالية على استخدام مستخلص الثوم الطازج تجاه بعض عوامل الضراوة كونه سهل الاستخدام وشائع الاستعمال ، حيث بينت نتائج التحليل الاحصائي وجود فرق معنوي في انتاج بعض عوامل الضراوة حيث فقدت العزلات قابليتها على تكوين الغشاء الحيوي ،كما انخفضت قابليتها على انتاج انزيم البروتييز، في حين لم يتأثر انتاج الهيمولايسين.

Keywords

Pseudomonas aeruginosa --- Molecular detection --- Garlic --- Virulence Factors.