research centers


Search results: Found 2

Listing 1 - 2 of 2
Sort by

Article
Different vectors used to transform and clone of nonstructural NS1 gene of Influenza B in Escherichia coli
استخدام ناقلات مختلفة لنقل واستنساخ الجين غير التركيبي NS1 لفيروس الإنفلونزا ب في بكتريا الايشريكية القولونية

Author: A.A. Dawood علي عادل داؤد
Journal: Iraqi Journal of Veterinary Sciences المجلة العراقية للعلوم البيطرية ISSN: 16073894/20711255 Year: 2019 Volume: 33 Issue: 2 Pages: 329-333
Publisher: Mosul University جامعة الموصل

Loading...
Loading...
Abstract

Flu is a highly contagious and common illness caused by influenza A, B, and C viruses. The aim of the present study was to investigate the transformation and cloning of NS1B gene with pET-32a, pET-32b and pQE-81L in Escherichia coli BL21(DE3) and DH5α. pUC57-NS1B synthetic gene was transform and clone in Escherichia coli BL21(DE3). Isolation, single digestion and ligation with pET-32b using HindIII restriction enzyme. Amplification of recombinant DNA was done with conventional PCR after transformation. Screening with IPTG of colonies. Gel electrophoresis was done for each step of cloning after isolation. Isolation, double digestion and ligation with pET-32a and pQE-81L using SacI, PstI and HindIII respectively. Recombinant DNA was attempted to be transformed into E. coli strains BL21 (DE3) and DH5α. pUC57 plasmid carrying NS1B gene was successful transformed and isolated from E. coli BL21 (DE3). Designed primers used for PCR of NS1B showed successful amplification. First screening of pET-32b-NS1B colonies using white/blue method, cloning NS1B into pET-32b using single restriction digestion with HindIII, pET-32a using double restriction digestion with SacI and HindIII and pQE-81L using double restriction digestion with PstI and HindIII gave unexpected result. This result may relate to re-ligation of digested vector for single digestion and uncompleted digestion for vectors of double restriction digestion. Current study has suggested that recombinant NS1B gene can be cloned using single digestion with other expression vectors.

يعتبر مرض الأنفلونزا مرضًا شائعًا ومُعدٍ بسبب فيروسات الأنفلونزا نوع أ و ب و سي. كان الهدف من هذه الدراسة هو البحث في تحويل واستنساخ الجين الغير تركيبي NS1B مع النواقل pET-32a، و pET-32b و pQE-81L في بكتريا الايشريكية القولونية نوع BL21 DE3 و DH5α. تم نقل الجين الغير تركيبي مع حامله pUC57-NS1B الاصطناعي وتم استنساخه في بكتريا الايشريكية القولونية نوع BL21 DE3. تم عزل وقطع الجين بإنزيم واحد وربطه مع الحامل pET-32b باستخدام أنزيم تقييد HindIII. تم إجراء تضخيم الحمض النووي المؤتلف باستخدام تقنية تفاعل البلمرة المتسلسل PCR التقليدي بعد النقل. تم الفحص باستخدام IPTG للمستعمرات البكتيرية. تمت عملية الترحيل الكهربائي للهلام لكل خطوة من خطوات عملية الاستنساخ بعد العزل. تم عزل وهضم الجين وربطه مع النواقل pET-32a و pQE-81L باستخدام أنزيمات التقييد SacI، PstI و HindIII على التوالي. تم محاولة ربط ونقل الحمض النووي المؤتلف إلى سلالات بكتريا الايشريكية القولونية نوع BL21 (DE3) و DH5α. تم تنقل البلازميد pUC57 الحامل للجين الغير تركيبي NS1B وعزله بنجاح في بكتريا الايشريكية القولونية نوع BL21 (DE3). وأظهرت البادءات المصممة المستخدمة لتفاعلات البلمرة المتسلسل PCR في تضخيم الجين الغير تركيبي NS1B نجاحا. أول كشف لمستعمرات البكتريا الحاملة ل pET-32b-NS1B باستخدام طريقة الأبيض / الأزرق. استنساخ الجين الغير تركيبي NS1B وربطه مع الناقل pET-32b باستخدام هضم الإنزيم المقيد الأحادي نوع HindIII، ومع الناقل pET-32a باستخدام عملية الهضم المزدوج باستخدام إنزيمي التقييد SacI و HindIII ومع الناقل pQE-81L باستخدام عملية الهضم المزدوج مع إنزيمي القطع PstI و HindIII أعطت نتيجة غير متوقعة. قد ترتبط هذه النتيجة بإعادة ربط الناقل على نقسه المهضوم بانزيم التقييد الاحادي والهضم غير المكتمل للنواقل ذات الهضم المزدوج. اقترحت الدراسة الحالية أنه يمكن استنساخ الجين الغير تركيبي NS1B المؤتلف باستخدام الهضم المفرد مع نواقل التعبير الأخرى.


Article
Some Biochemical and Cellular laboratory Indicators in the Cerebral Spinal Fluid among Suspected Bacterial Meningitis Patients
بعض المؤشرات المختبرية البايوكيميائية والخلوية في السائل الشوكي الدماغي بين مرضى التهاب السحايا الجرثومي المشتبه بهم.

Authors: Enáam Ab. Al-Jabber Rasol انعام --- Baqur A.Sultan --- Hayder k. Hassoun
Journal: kufa Journal for Nursing sciences مجلة الكوفة لعلوم التمريض ISSN: 22234055 Year: 2019 Volume: 9 Issue: 1 Pages: 1-6
Publisher: University of Kufa جامعة الكوفة

Loading...
Loading...
Abstract

Background: This study was conducted on 200 children and adult of both sexes who attended Al- Zahra Maternity and Children Teaching Hospital &Middle Euphrates Neuroscience Center in Al-Najaf province from July 2016 to July 2017 because they complaining of some symptoms that may related to meninges infection. The mean ages of suspected patients were 13.09 years for males (109), and 11.28 years for females (91).Aim of study: Identification of biochemical contents (glucose and protein level) and cell count (neutrophil and lymphocyte) of CSF among patients with meningitis.Methodology: The biochemical examination of spinal cord fluid (glucose and protein level), as well as the number of white blood cells (lymphocytes and rectangles), was conducted for the period from June 2016 to June 2017. All the biochemical tests (glucose and protein), counting the cells of the spinal cord fluid, making the direct swabs and dyeing them with chromium were done. In addition, the samples were planted with special farms for all the subjects. The average glucose level in cerebrospinal fluid of meningitis patients was 62.54 mg / dl. While the mean total protein level in CSF of meningitis patients was 27.23 mg / dl. Equivalent and lymphatic cell counts were predominant in the same spinal fluid of patients. Results: The mean level of glucose in CSF of meningitis patients was 62.54 mg/dl. The mean level of total protein in CSF of meningitis patients was 27.23mg/dl. Neutrophil & lymphocyte was the predominant cell in CSF of all suspected meningitis patients.Conclusion: The positive parameters in the analysis of CSF may be used to differentiate between bacterial and non- bacterial meningitis. Positive bacterial meningitis does not depend on the result of CSF sugar & protein only. Recommendation: Give priority to medical soon attending and laboratory analysis Keyword: CSF, bacterial meningitis, streptococcus pneumonia, Neisseria meningitides, Haemophilus influenza.

خلفية البحث: أجريت هذه الدراسة على 200 طفل وبالغ من كلا الجنسين الذين راجعوا مستشفى الزهراء التعليمي للولادة والاطفال ومركز الفرات الأوسط للأمراض العصبية في محافظة النجف من تموز 2016 إلى تموز 2017 لمعاناتهم من بعض الأعراض التي قد تكون ذات صلة بالتهاب السحايا, كان متوسط أعمار المرضى المشتبه بهم 13.09 سنة للذكور (109) ، و 11.28 سنة للإناث (91).الهدف : تحديد الاختبارات الكيمياء الحيوية ( مستوى الكلوكوز و البروتين) , وكذلك عد خلايا الدم البيضاء ( الخلايا اللمفاوية والعدلات ) في مرضى التهاب السحايا . المنهجية : تم إجراء الفحص الكيميائي الحيوي لسائل النخاع الشوكي (مستوى الكلوكوز والبروتين) ، وكذلك عدد خلايا الدم البيضاء (الخلايا اللمفاوية والعدلات), واجريت هذه الدراسة للفترة من حزيران 2016 الى حزيران 2017 . وقد اجريت جميع الفحوصات البايوكيميائية (الكلوكوز و البروتين ) و عد الخلايا لسائل النخاع الشوكي و عمل المسحات المباشرة وصبغها بصبغة كرام و اضافة الى ذلك تم زرع العينات بمزارع خاصة لجميع المشمولين بالدراسة . وكان متوسط مستوى الجلوكوز في السائل النخاعي من مرضى التهاب السحايا 62.54 ملغ / دل. في حين كان متوسط مستوى البروتين الكلي في السائل النخاعي من مرضى التهاب السحايا 27.23 ملغ / دل. نسب الخلايا المتعادلة واللمفاوية كانت هي السائدة في نفس السائل الشوكي للمرضىالنتائج: كان متوسط مستوى الجلوكوز في السائل النخاعي الشوكي لمرضى التهاب السحايا 62.54 ملغم / ديسيلتر. و كان متوسط مستوى البروتين الكلي 27.23 ملجم / ديسيلتر , كانت العدلات هي الخلية السائدة لجميع مرضى التهاب السحايا المشتبه بهم.الاستنتاجات:1. يمكن استخدام الاختبارات الكيميائية الموجبة في تحليل سائل النخاع الشوكي للتمييز بين التهاب السحايا الجرثومي وغير الجرثومي. 2. لا يعتمد التهاب السحايا الجرثومي الإيجابي على نتيجة السكر والبروتين في سائل النخاع الشوكي فقط.التوصيات: إعطاء الأولوية للمراجعة المبكرة للمريض واجراء التحاليل المختبرية.

Listing 1 - 2 of 2
Sort by
Narrow your search

Resource type

article (2)


Language

Arabic and English (1)

English (1)


Year
From To Submit

2019 (2)