Isocratic high performance liquid chromatography on reversed phase a (150x 4.6 mm I.D), 5 μm μ-Bondapak RP-8 column (with acidic mobile phase allow the separation of doxcycycline hydrochloride with low detection limit of 0.2 µg/ml detected by UV set at 226 nm. The method was validated for Doxycycline between 0.156- to 5 µg/ml. The concentration of doxycycline was assessed in two single dose randomized crossover studies with intervals of one week between two period. In sera of 20 adults healthy male volunteers with average age of (42 + 10) year, body weight 48-85 kg, body height of (160-185cm) after a single dose of doxycycline hydrochoride 100 mg in form of capsules were orally administrated for both formulations. The blood samples (2ml) were drawn concomitantly from 0.5 – 24 hours. µg The pharmacokinetics parameter were obtained from the mean serum concentration measured at various sampling times for both formulations. The maximum peak concentration (Cmax) of doxycycline reference drug from Pfizer In serum was (3.1 +0.094 µg /ml) attained in 2 hrs. While the maximum concentration (Cmax) of test drug doxysam (2.8 +0.098 µg /ml) attained in about 2 hrs, both drug have long elimination time with half time of approximately (13 hrs.) Both test and reference drug were show no significant difference in pharmacokinetics parameters, so they were considered to be bioequivalent.

طريقة الطور الثابت كروموتوكرافيا الطور العكوس، بأستخدام عمود RP-8 (mm id 4.6×150) بأستخدام طور سائل محمض لفصل مادة دوكسي سايكلين بحد كشف 0.2 مايكروغرام/سم3 بأستخدام كاشف الأشعة فوق البنفسجية عند طول موجي 220 nm. الطريقة صالحة لقياس دوكسي سايكلين بين 0.156-5 µg/ml .تم قياس تركيز دوكسي سايكلين بإعطاء جرعة واحدة من كل دواء بينهما فترة أسبوع واحد. في مصل الدم 20 من المتطوعين الأصحاء، بمعدل أعمار بين 42 ± 10 سنة، أوزان الأجسام بين (48 – 85 كغم) و أطوال الأجسام بين (160 – 185 سم)، بعد أعطاء جرعة 100 ملغم بصيغة كبسولة أعطيت من كلا التركيبتين. نموذج مصل الدم 2 مل تم سحبه بأوقات مختلفة بين 0.5 – 24 ساعة.تم استخراج عوامل حركة الدواء من معدل تراكيز الدواء للقياسات بين الأوقات المحددة لكلا التركيبتين. أعلى تركيز لتركيبة دوكسي سايكلين من شركة بايزر كان(3.1 +0.094 µg/ml) ، بينما أعلى تركيز لشركة سامراء كان(2.8 +0.098µg/ml) تم حصوله خلال 2 ساعة. كان لكلا التركيبين زمن عالي لطرح الدواء خلال 13 ساعة. حركة الدواء لكلا التركيبتين النموذج مع الدواء القياسي لم تظهر فروقات معنوية لذا يمكن أعتبار التركيبتين متكافئة.

Bioequivalence of two doxycycline --- pharmacokinetics --- HPLC.

The pharmacokinetics and bioequivalence of a newly developed extended-released (ER) tablet containing 400 mg pentoxifylline as a test product was compared with the reference brand product Trental® 400 mg ER tablet produced by Sanofi-Aventis. Two separate studies were conducted simultaneously. The first study was conducted under fasting condition, whereas, the second study was conducted under fed condition; using the same batches of the test and reference products in both studies. In each study, both products were administered to 32 healthy male adult volunteers applying a single-dose, two-treatment, two-period, two-sequence, randomized crossover design with one-week washout period between dosing. Twenty two blood samples were withdrawn from each volunteer over 24 hours period. Pentoxifylline concentrations were determined in plasma by a validated HPLC method according to FDA Bioanalytical Method Validation Guidance using UV detection and chloramphenicol as internal standard. The lower limit of quantitation of the drug in plasma was 5 ng/ml and the upper limit of quantitation was 500 ng/ml. From the plasma concentration-time data of each individual, the pharmacokinetic parameters; Cmax, AUC0-t, AUC0-, Cmax/AUC0-, Tmax, Z & T0.5; were calculated applying non-compartmental analysis. Data of the test and reference products were statistically analyzed to test for bioequivalence of the two products, using criteria of FDA and EMEA Guidance. The pharmacokinetic parameters mentioned above were statistically analyzed by descriptive statistics, ANOVA test and 90% Confidence Interval (CI). ANOVA test involved the calculation of the effects of: treatment, period, sequence and subjects nested in sequence. According to the above guidance, the primary pharmacokinetic parameters used for bioequivalence testing, namely Cmax, AUC0-t and AUC0- were also statistically analyzed by ANOVA & CI tests using the corresponding Ln-transformed values. The mean values Cmax, AUC0-t , AUC0- , Cmax/AUC0- , Tmax, Z & T0.5 for the test formula obtained from the fasting study were; 144.4 ng/ml, 845.4 ng.hr/ml, 868.4 ng.hr/ml, 0.186 hr-1, 3.29 hr, 0.561 hr-1 and 1.65 hr, respectively; and the mean values of these parameters for the reference formula were; 150.0 ng/ml, 871.1 ng.hr/ml, 893.7 ng.hr/ml, 0.177 hr-1, 3.70 hr, 0.558 hr-1 and 1.59 hr, respectively. The mean values of the above mentioned parameters for the test formula obtained from the fed study were; 157.8 ng/ml, 826.5 ng.hr/ml, 853.8 ng.hr/ml, 0.198 hr-1, 5.4 hr, 0.458 hr-1 and 2.06 hr, respectively; and the mean values of these parameters for the reference formula were; 162.1 ng/ml, 869.7 ng.hr/ml, 894.8 ng.hr/ml, 0.196 hr-1, 4.1 hr, 0.525 hr-1 and 1.80 hr, respectively. Based on criteria of FDA and EMEA Guidance on Bioavailability and Bioequivalence, the results of the fasting and fed studies demonstrated bioequivalence of the two products under either condition. Accordingly, it is concluded that the newly developed ER tablet containing 400 mg pentoxifylline is bioequivalent to Trental® 400 mg ER tablet produced by Sanofi-Aventis.

تمت مقارنة حركية الدواء والتكافؤ ألحيوى بين منتج دوائى جديد لحبوب ألبنتوكسيفلين طويلة ألمفعول (ER) تحوى على 400 ملغ من عقار ألبنتوكسيفلين مع ألمنتج ألمرجعى ترنتال 400 ملغ لشركة سنوفى أفينتس. تم عمل دراستين فى نفس الوقت. ألدراسة ألاولى تمت بدون طعام بينما انجزت ألدراسة ألثانية مع ألطعام باستعمال نفس ألوجبة من كل منتج. فى كل دراسه تم أعطاء كل منتج ألى 32 متطوع باستعمال ألتصميم ألعشوائى وبفترة اسبوع بين ألجرع. تم سحب 22 عينة دم من كل متطوع ولفترة 24 ساعة وتم حساب تراكيز ألبنتوكسيفلين بالبلازما بواسطة HPLC / UV وحسب دستور ألتحليل ألآمريكى واستعمال عقار ألكرومفنيكول كمقياس داخلى. الحد ألادنى لتحليل الدواء فى ألدم 5 ng/ml والحد ألآعلى 500 ng/ml. معامل حركية ألدواء فى ألجسم وهىCmax, AUC0-t, AUC0-¥, Cmax/AUC0-¥, Tmax, lZ & T0.5 تم حسابها ثم مقارنتها بين ألمنتج ألجنيس والمرجعى لغرض تقييم ألتكافؤ ألحيوى حسب الدستور ألأمريكى وألآوربى. بالنسبة للدراسة ألآولى بدون طعام فالنتائج لمعدل معامل حركية ألدواء Cmax, AUC0-t , AUC0-¥ , Cmax/AUC0-¥ , Tmax, lZ & T0.5 وحسب ألتوالى للمنتج ألجنيس هى :144.4 ng/ml, 845.4 ng.hr/ml, 868.4 ng.hr/ml, 0.186 hr-1, 3.29 hr., 0.561 hr-1 ,1.65 hr.وللمنتج ألمرجعى هى: 150.0 ng/ml, 871.1 ng.hr/ml, 893.7 ng.hr/ml, 0.177 hr-1, 3.70 hr., 0.558 hr-1 , 1.59 hr. أما للدراسة ألثانية مع ألطعام فالنتائج للمنتج ألجنيس هى: 157.8 ng/ml, 826.5 ng.hr/ml, 853.8 ng.hr/ml, 0.198 hr-1, 5.4 hr., 0.458 hr-1 , 2.06 hr.; وللمنتج ألمرجعى هى:162.1 ng/ml, 869.7 ng.hr/ml, 894.8 ng.hr/ml, 0.196 hr-1, 4.1 hr., 0.525 hr-1, 1.80 hr. بناء على ألدستور ألأمريكى وألأوربى فان ألنتائج ألمذكوره أعلاه تدل على وجود تكافؤ حيوى بين ألمنتجين عند تناول ألدواء مع ألطعام وبدون طعام. لذلك فمن الممكن ألأستنتاج بان ألمنتج طويل ألمفعول ((ER ألمطور حديثا ألذى يحتوى على 400 ملغ من البنتوكسيفلين مكافؤ حيويا مع ترنتال 400 ملغ طويل ألمفعول ((ER المنتج من شركة سنوفى أفينتس.

Pentoxifylline --- Pharmacokinetics --- Bioequivalence --- بنتوكسيفلين --- حركية الدواء --- ألتكافؤ ألحيوى

Objective: The study was performed to compare the bioavailability (bioequivalence) of a newly developed generic formula of clopidogrel 75 mg tablet as a test product against Actavis tablet containing 75 mg clopidogrel as the reference formula. Methods: The newly developed generic formula of clopidogrel tablet was prepared using co-processed excipients composed mainly of microcrystalline cellulose, superdisintegrant, glidant, and magnesium stearate. In vitro dissolution test was done first to compare the test to the reference formulas, followed by the in vivo study. Both drug products were administered to 40 Iraqi male healthy adult subjects under fasting state applying randomized, two periods, two sequences, two-way crossover design with one week washout period between dosing. Blood samples were obtained over 72 hours interval from each subject, and the concentrations of the inactive metabolite of clopidogrel (clopidogrel carboxylic acid) were determined in serum by LC-MS/MS method. From serum concentration versus time data of each subject, the pharmacokinetics parameters AUC0-t, AUC0-infinity, Cmax, Tmax, and T0.5 were calculated applying non-compartmental data analysis. Results: The dissolution profile of the test product was found to be similar to the reference product with similarity factor (f2) equal to 79.4%. The geometric mean ratios of the primary pharmacokinetic parameters used for bioequivalence testing of the test/reference products were; 102.47% for AUC0-t, 102.68% for AUC0-infinity and 101.85% for Cmax. The 90% confidence intervals for AUC0-t, AUC0-infinity and Cmax were 93.46-109.18 %, 98.78-108.32% and 91.65-104.33%, respectively. Since the 90% confidence intervals for these parameters were within the 80–125% interval proposed by FDA, it was concluded that the newly developed clopidogrel 75 mg tablet was bioequivalent to the reference product produced by Actavis in term of both the rate and extent of absorption and bioavailability. Consequently, the newly developed clopidogrel 75 mg tablet is interchangeable with clopidogrel 75 mg tablet manufactured by Actavis and can be prescribed as an alternative in the Iraqi market.

أجريت الدراسة لمقارنة التوافر البيولوجي (التكافؤ الحيوي) لصيغة جنيسة حضرت حديثا من كلوبيدوغريل 75 ملغ قرص كمنتج اختبار ضد قرص أكتافيس تحتوي على 75 ملغ كلوبيدوغريل كصيغة مرجعية. تم تحضير الصيغة الجنيسة التي تم تطويرها حديثا من قرص كلوبيدوغريل باستخدام سواغ معالج يتألف بشكل اساسي من المايكروكريستلاين سليلوز ، مفتت عالي السرعة، مزلق، وستيرات المغنيسيوم. في اختبار مختبري للانحلال تم أولا لمقارنة الصيغة الجنيسة مع الصيغة المرجعية، تلتها دراسة في الجسم الحي. تم إعطاء كلا المنتجات الدوائية ل 40 شخصا عراقيا بالغا من الذكورذو صحة جيدة وفي حالة الصيام مع اتباع تصميم دراسة ذو عشوائية، وفترتين، تسلسلين، في اتجاه ثنائي متبادل مع فترة غسل أسبوع واحد بين الجرعتين. تم الحصول على عينات الدم على مدى 72 ساعة على فترات من كل شخص، وتم تحديد تركيزات المستقلب غير النشط من كلوبيدوغريل (كلوبيدوجريل حمض الكربوكسيلك) في مصل الدم بواسطة تقنية أل سي- ماس / ماس. من تركيز المصل مقابل الوقت لكل شخص ، تم حساب معايير حركية الدواء التي تشمل المساحة تحت المنحني من الصفر لغاية اخر قراءة، المساحة تحت المنحني من الصفر لغاية اللانهاية، أعلى تركيز للدواء بالمصل، الوقت للوصول الى أعلى تركيز للدواء بالمصل ، وعمر النصف T0.5 بتطبيق تحليل البيانات غير المقسم. وقد تبين أن مظهر الانحلال لمنتج الاختبار مشابه للمنتج المرجعي مع معامل التشابه (f2) يساوي 79.4 في المائة. وكانت نسب المتوسط الهندسي لمعايير حركية الدواء المستخدمة لاختبار التكافؤ الحيوي للمنتجات الاختبار / المرجعية؛ 102.47٪ للمساحة تحت المنحني من الصفر لغاية اخر قراءة ، 102.68٪ للمساحة تحت المنحني من الصفر لغاية اللانهاية و 101.85٪ لأعلى تركيز للدواء بالمصل. كانت نسبة الثقة 90٪ للمساحة تحت المنحني من الصفر لغاية اخر قراءة ، ٪ للمساحة تحت المنحني من الصفر لغاية اللانهاية و لأعلى تركيز للدواء بالمصل هي 93.46-109.18٪، 98.78-108.32٪ و 91.65-104.33٪، على التوالي. وبما أن 90٪ من نسبة الثقة لهذه ا معايير كانت ضمن الفاصل الزمني 80-125٪ الذي اقترحته ادارة الاغذية والعقاقير، نستنتج أن قرص كلوبيدوغريل 75 ملغ الذي تم تطويره حديثا كان مكافئ بيولوجيا للمنتج المرجعي الذي ينتجه أكتافيس على حد سواء من حيث معدل ومدى الامتصاص والتوافر البيولوجي. ونتيجة لذلك، قرص كلوبيدوغريل 75 ملغ الذيحضر حديثا قابلة للتبديل مع كلوبيدوغريل 75 ملغ قرص المصنعة من قبل أكتافيس ويمكن وصفها كبديل في السوق العراقية.

New developed clopidogrel 75 mg tablet --- Actavis --- dissolution --- Pharmacokinetics --- relative bioavailability --- bioequivalence.