research centers


Search results: Found 6

Listing 1 - 6 of 6
Sort by

Article
EXTRACTION AND PURIFICATION OF PROTEASE FROM LOCALLY OKRA PODS (ABELMOSCHUS ESCULENTUS)
استخلاص وتنقية بروتييز قرنات الباميا Abelmoschus esculentus المحلية

Authors: A. W. Mohi Rayitali84@gmail.com --- Kh. A. Shakir dr_khalida55@yahoo.com
Journal: Iraqi Journal of Agricultural Science مجلة العلوم الزراعية العراقية ISSN: 00750530/24100862 Year: 2015 Volume: 46 Issue: 3 Pages: 426-432
Publisher: Baghdad University جامعة بغداد

Loading...
Loading...
Abstract

This study aimed to extract, purify, and characterize the protease of local Okra Abelmoschus esculentus pods. The extraction process was conducted using ten extraction solutions with different pH and ionic strength values. Phosphate buffer solution with (pH 7, 0.05M, containing 2% sodium chloride) gave the highest activity which was (7.2 Unit/ml) as compared to other solutions, which ranged from 0.8-5.9 Unit/ml. The extracted enzyme purified by several stages. Being, precipitation by gradual addition of Ammonium sulphate from 20 to 85% saturation, then the precipitated enzyme was dialyzed and fractionated through DEAE-Cellulose (22X1.1cm), the enzymic fractions were pooled. The specific activity, purification fold and the enzyme yield values were 21.52 units/mg, 1.24 and 82.83% respectively. For further purification the enzyme fractions applied to G-75 Sephadex column (65x 1.5cm), the specific activity, enzyme yield and purification fold value were 98.82Unit/mg, 46.70%, 5.1, respectively .Electrophoresis analysis in the absence of SDS showed single band as indicator for enzyme purity. In conclusion, Okra pods could be one of natural source for proteases and this study recommended further studies regarding the adequate means for removal of the mucilage in order to increase the extraction efficiency.

هدفت هذه الدراسة إلى استخلاص وتنقية بروتييز قرنات البامياAbelmoschus esculentus المحلية إذ اجريت عملية الاستخلاص باستخدام عشرة محاليل مختلفة في الرقم الهيدروجيني والقوة الأيونية، إذ أعطى محلول دارئ الفوسفات برقم هيدروجيني 7 وتركيز 0.05 مولار بوجود 2% كلوريد الصوديوم اعلى فعالية بالمقارنة بالمحاليل الأخرى بلغت الفعالية 7.2 وحدة/مل في حين تراوحت الاخريات بين 0.8-5.9 وحدة/مل. تلى ذلك عملية تنقية الأنزيم على عدة مراحل شملت الترسيب بكبريتات الأمونيوم بنسبة تشبع بين 20-85% إذ أعطت فعالية نوعية وعدد مرات تنقية وحصيلة أنزيمية (21.52 وحدة/ملغم و1.24 مرة و82.83%) بالتتابع، ثم مرر الأنزيم على عمود DEAE-cellulose بأبعاد 1.1×22 سم والذي نتج عنها فعالية نوعية بلغت 88.50 وحدة/ملغم، فعالية كلية 566.40، في حين كانت عدد مرات التنقية والحصيلة الإنزيمية لها 5.1 و46.67% بالتتابع، واستكملت عملية التنقية باستخدام الترشيح الهلامي باستخدام هلام السيفادكس G-75بأبعاد 1.5×65 سم إذ أعطت فعالية نوعية وعدد مرات تنقية وحصيلة إنزيمية (98.82 وحدة/ملغم و5.7 مرة و40.17%) بالتتابع، في حين أجريت عملية التأكد من نقاوة الإنزيم باستخدام الترحيل الكهربائي لهلام الاكريل امايد 10% NATIVE-PAGE بغياب المواد الماسخة والتي أظهرت وجود حزمة بروتينية واحدة تابعة لبروتييز قرنات الباميا, وبالنتيجةً، يمكن لقرون الباميا ان تكون أحد المصادر الطبيعية للبروتييزات، وتوصي الدراسة الحالية بمزيد من البحوث بشأن الوسائل الملائمة لإزالة المادة الصمغية ومن ثم زيادة كفاءة الاستخلاص الأنزيمي.


Article
EXTRACTION AND PURIFICATION OF UREASE FROM ZAHDI DATES PALM SEED(Phoenix dactylifera L.)2. PURIFICATION UREASE FROM ZAHDI DATES PALM SEED
إستخلاص وتنقية أنزيم اليوريز من نوى تمرالزهدي Phoenix dactylifera.L2- تنقية أنزيم اليوريز من نوى تمرالزهدي

Authors: عصام فاضل الجميلي3 --- خالدة عبد الرحمن شاكر2 --- فريال حياوي محمد الشكرجي1
Journal: Iraqi Journal of Biotechnology المجلة العراقية للتقانات الحياتية ISSN: 18154794 Year: 2010 Volume: 9 Issue: 4 Pages: 770-781
Publisher: Baghdad University جامعة بغداد

Loading...
Loading...
Abstract

الخلاصة
نُقي أنزيم اليوريز المستخلص من نوى تمر الزهدي Phoenix dactylifera. L، بطريقة تضمنت عدة خطوات شملت التركيز بكبريتات الأمونيوم بنسبة إشباع (40-60%) مع إجراء عملية الديلزة بإستعمال محلول الفوسفات الدارئ بتركيز 20 ملي مولار ورقم هيدروجيني8، بعد ذلك مرر الناتج خلال عمود يحوي على المبادل الآيوني ثنائي أثيل أمنيوأاثيل سليلوز DEAE-Cellulose ثم الترشيح الهلامي مرتين على عمود هلام السيفاكريل S-200 وكان عدد مرات التنقية للمستخصر الانزيمي 68.69 مره وبحصلية أنزيمية 24.26%، وبلغت نقاوة الأنزيم حد التجانس وتم تأكيد ذلك بإستعمال تقنية الترحيل الكهربائي في هلام الاكريل أمايد المتعدد بغياب المواد الماسخة للبروتين (SDS).








الخلاصةبطريقة تضمنت عدة ،Phoenix dactylifera. L نُقي أنزيم اليوريز المستخلص من نوى تمر الزهدي60 %) مع إجراء عملية الديلزة بإستعمال - خطوات شملت التركيز بكبريتات الأمونيوم بنسبة إشباع ( 40محلول الفوسفات الدارئ بتركيز 20 ملي مولار ورقم هيدروجيني 8، بعد ذلك مرر الناتج خلال عمود يحويثم الترشيح الهلامي مرتين على DEAE-Cellulose على المبادل الآيوني ثنائي أثيل أمنيوأاثيل سليلوزوكان عدد مرات التنقية للمستخصر الانزيمي 68.69 مره وبحصلية أنزيمية S- عمود هلام السيفاكريل 200%24.26 ، وبلغت نقاوة الأنزيم حد التجانس وتم تأكيد ذلك بإستعمال تقنية الترحيل الكهربائي في هلام.(SDS) الاكريل أمايد المتعدد بغياب المواد الماسخة للبروتين


Article
Extraction and purification of L-Asparaginase II from local isolate of Proteus vulgaris
استخلاص وتنقية أنـزيم L-Asparaginase II المنتج مـن بكتريـا vulgaris Proteus المعزولة محلياً

Authors: Sarab K. Salman سراب سلمان كاظم --- Methal A. Abd Aon مثال عبد الكريم عبد عون --- Shahlaa A. Hassan شهلاء علي حسن --- Asmaa M. Suo’d اسماء محمد سعود --- et al.
Journal: Baghdad Science Journal مجلة بغداد للعلوم ISSN: 20788665 24117986 Year: 2011 Volume: 8 Issue: 1عدد خاص بمؤتمر علوم الحياة Pages: 509-518
Publisher: Baghdad University جامعة بغداد

Loading...
Loading...
Abstract

Forty one isolates of genus Proteus were collected from 140 clinical specimens such as urine, stool, wound, burn, and ear swabs from patients of both sex. These isolates were identified to three Proteus spp. P. mirabilis, P. vulgaris and P. penneri .The ability of these bacteria to produce L-asparaginase II by using semi quantitative and quantitative methods was determined. P. vulgaris Pv.U.92 was distinguished for high level of L-asparaginase II production with specific activity 1.97 U/mg. Optimum conditions for enzyme production were determined; D medium with 0.3% of L-asparagine at pH 7.5 with temperature degree 35°C for incubation. Ultrasonication was used to destroy the P. vulgaris Pv.U.92 cells then ASNase II was extracted and purified throughout several purification steps including precipitation with (NH4)2SO4(60-80%), DEAE-cellulose ion exchanger chromatography followed by Sephacryl S-300 filtration. The specific activity was 155.6 U/ mg and the purification fold was 27.3 with 10.4% yield.

تم الحصول على 41 عزلة تعود لجنس Proteus من مجموع 140 عينة سريريه من عينات مختلفة شملت عينات الإدرار، الخروج، الجروح، الحروق ومسحات الإذن لكلا الجنسين. هذه العزلات تم تشخيصها وفقـاً لصفاتـها المظهريـة والاختبارات الكيموحياتية إلى ثلاثـة أنواع هيP. mirabilis ، P. vulgari و P. penneri. أختبرت قابلية هذه العزلات لإنتاج إنزيم L-asparaginase II باستخدام طرائق كمية وشبه كمية. وقد أختيرت بكتريا P. vulgaris Pv.U.92 كأفضل عزلة منتجة للأنزيم حيث بلغت الفعالية النوعية للإنزيم 1.97 وحدة/مليغرام. حددت الظروف المثلى للإنتاج وكان الوسط D المحتوى على%0.3 من المادة الأساس (L-asparagine) عند الأس الهيدروجيني 7.5 الأمثل لإنتاج الإنزيم عند حضنه بدرجة حرارة 35 مº.أستخلص ASNase II من خلايا P. vulgaris Pv.U.92بعد تكسيرها بطريقة الأمواج الصوتية الفائقة (ulrasonication) ثم رسب المستخلص الناتج بأملاح الامونيوم (% 80-60) ونقي الإنزيم باستعمال المبادل الأيوني DEAE-cellulose ثم مرر بعمود Sephacryl S-300 وقد بلغت الفعالية النوعية 155.6 وحدة/مل غرام وبمحصلة إنزيمية % 10.4 وبعدد مرات التنقية 27.3 .


Article
PARTIAL PURIFICATION OF NEUTRAL PROTEASE FROM A LOCAL ISOLATE OF ASPERGILLUS NIGER VAR. CARBONARIUS TFS1 AND ITS APPALICATION
تنقية جزئية للبروتييز المتعادل من العزلة المحلية للفطر Aspergi llus niger var carbonarius TFS1 وتطبيقاته

Author: شيماء إسماعيل كاظم1
Journal: Iraqi Journal of Biotechnology المجلة العراقية للتقانات الحياتية ISSN: 18154794 Year: 2010 Volume: 9 Issue: 3 Pages: 461-473
Publisher: Baghdad University جامعة بغداد

Loading...
Loading...
Abstract

Neutral protease was purified partially from local isolate of Aspergillus niger var. carbonarius TFS1 by two steps ,the first step was the precipitations for ammonium sulfate (25-50% saturated) gave the specific activity was 9471.84 unit/mg protein, purification folds were 2.765 and recovery was 81.3%. The second step by using DEAE–cellulose ion exchange chromatography, the specific activity was 4.298 with 68.70% recovery. The optimum pH for enzyme activity was7and rang of pH stability was 6.5–7.5 while the optimum temperature was 30C and temperature stability was 30-35C. The enzyme was immobilized by absorption on the sawdust and used in the removal hair and bating process alternative to chemicals and imported enzyme used in tanning plant in Zaafaraniya of the General Company for Leather Industries. The immobilize enzyme was tested by engineers specializing in laboratory tanning on the skin of goats. The most efficient in removing hair from the skins of goat leather gave by the enzyme concentration 4500 units/ml after 12 hours. Also The enzyme gave activity in bating process 2109.58 unit/gram (LVU) while the activity of Arabon enzyme was 1935.68 unit/gram (LVU) which used routinely in the tanning factory.

تم تنقية البروتييز المتعادل جزئياً من العزلة المحلية للفطر Aspergillus niger varcarbonarius TFS1 بخطوتين شملت الاولى الترسيب بكبريتات الأمونيوم بنسبة إشباع 25-50% إذ أعطت فعالية نوعية 9471.84 وحدة/ ملغم بروتين وبعدد مرات تنقية 2.765 وبحصيلة إنزيمية 81.3% أما الخطوة الثانية فقد شملت كروموتوغرافيا التبادل الايوني بإسلوب الوجبة بإستعمال المبادل الآيونيDEAE-Cellulose إذ بلغت الفعالية النوعية14721.43وحدة/ملغم بروتين وعدد مرات تنقية 4.298 وحصيلة إنزيمية %68.70. كان الرقم الهيدروجيني الامثل للثبات7 والفعالية الأنزيمية 6.5 -7.5، إما درجة الحرارة المثلى للثبات 30م الفعالية 30 – 35 م. كما قيد الأنزيم على نشارة الخشب وأستعمل في عمليتي التطرية وإزالة الشعر كبديل عن المواد الكيميائية والأنزيم المستورد الذي يستعمل في معمل الدباغة في الزعفرانية التابع للشركة العامة للصناعات الجلدية وتم إختبار الأنزيم من قبل مهندسين مختصين في معمل دباغة مختبري على جلد الماعز إذ اظهر تركيز 4500 وحدة نشاط انزيمي/مليليتر فعالية في إزالة الشعر من جلود الماعـز بعد 12 ساعة. كـما أظهـر فعـالية في عـملية التطرية بلغت 2109.58 وحدة/غم(LVU) بينما بلغت الفعالية الأنزيمية لانزيم الاربون المستورد والمستعمل في معمل الدباغة التابع للشركة العامة للصناعات الجلدية1935.68 وحدة/غم(LVU).


Article
EXTRACTION AND PURIFICATION OF CYTOSINE DEAMINASE PRODUCED FROM Escherichia coli
استخلاص وتنقية أنزيم سايتوسين دي أمينيزالمنتج من البكتريا Esherichia coli

Author: صفاء عبد لطيف1
Journal: Iraqi Journal of Biotechnology المجلة العراقية للتقانات الحياتية ISSN: 18154794 Year: 2010 Volume: 9 Issue: 3 Pages: 490-501
Publisher: Baghdad University جامعة بغداد

Loading...
Loading...
Abstract

The study involved isolation and characterization of E. coli from patient’s infected with diarrhea, in order to study the ability of the bacteria to produce cytosine deaminase (CD). The CD was extracted by destruction of cells using ultrasonic waves, the value of specific activity of crude extract was 5.3 unit/mg protein. Then the enzyme was purified in few steps including treatment of extract by heating at 60 oC for 30 min. The value of specific activity was 6.2 unit/mg protein, fold of purification was 1.2 times, and the yield was53.8 %. Then the enzyme was precipitated by using ammonium sulfate at 30-55% saturation percentage, the precipitate was dissolved in 0.5M potassium phosphate buffer. The value of specific activity was 10.8 unit/mg proteins, fold of purification was 2.0 times, and the yield was 3.59%. Then the enzyme solution was passed through DEAE-Cellulose column chromatography. The peaks of activity was collected and the value of specific activity was 189.9 unit/mg protein, fold of purification was 34.3 times, and the yield was 5.0%. The enzyme solution was concentrated and passed through Sepharose-6B gel-filteration and the value of specific activity was 302.0 unit/mg protein, fold purification 57.3 run, and yield was 2.1 %.

تضمنت الدراسة عزل وتوصيف بكتريا E. coli من المرضى المصابين بالاسهال لغرض تحديد قابليتها على إنتاج أنزيم سايتوسين دي امينيز. أستخلص الأنزيم بالتكسير باستعمال الامواج فوق الصوتية إذ بلغت قيمة الفعالية النوعية للمستخلص الخام 5.3 وحدة/ ملغرام بروتين ونقي الأنزيم بعدة خطوات تضمنت المعاملة بالحرارة بدرجة 60 ْ م مدة ثلاثين دقيقة, اذ بلغت الفعالية النوعية 6.2 وحدة/ملغرام بروتين وعدد مرات التنقية1.2 مرة والحصيلـة الأنزيمية 53.8 %. ثم رُسب الأنزيم باستعمال كبريتات الامونيوم بنسبة ألاشباع 30-55% وقد أذيب الراسب بداريء فوسفات البوتاسيوم ( 0.5) مولار) وكانت قيمة الفعالية النوعية 10.8وحدة /ملغرام بروتين وعدد مرات التنقية 2.1 مرة وحصيلة أنزيمية مقدارها 5.6، ثم مُرر المحلول الأنزيمي خلال عمود التبادل الآيوني باستعمال المبادل الايوني DEAE-Cellulose إذ كانت الفعالية النوعية 189.9 وحدة/ ملغرام بروتين وعدد مرات التنقية 34.3 مرة وحصيلة أنزيمية 5.0 % وبعدها مرر المحلول الأنزيمي على عمود هلام Sepharose 6B إذ بلغت قيمة الفعالية النوعية 302.3 وحدة/ ملغرام بروتين وبعدد مرات تنقية 57.2 مرة وحصيلة انزبمية مقدارها 2.1 %.


Article
تنقية وتوصيف أنزيم الأنيولينيز من الفطر Aspergillus niger المعزول محليا

Authors: علي عبد الكاظم --- ناجح هاشم كاظم --- أم البشر حميد جابر
Journal: Journal of University of Babylon مجلة جامعة بابل ISSN: 19920652 23128135 Year: 2016 Volume: 24 Issue: 8 Pages: 2221-2238
Publisher: Babylon University جامعة بابل

Loading...
Loading...
Abstract

Inulinase from A. niger local isolate was purified.The purification steps included precipitation with ethanol 70% ,Ion exchange chromatography with DEAE-cellulose and finaly ,gel filteration (two steps) using Sephadex G-150.Two forms of inulinase (W and A) were obtained from the purification procedure used. Inulinase forms were purified with (6.8 and 9.4) fold and (9 and 13.5) % yield , respectively. Electrophoresis results confirmed the complete purity to the two enzyme forms since they gave a single band in polyacrylamide gel electrophoresis.Enzyme characterization revealed that the molecular weight of the W and A forms were 72.4 and 69.18 ,respectively. The optimum pH activity was 4.5 for both enzyme forms . The W form was stable within the range (3.5-7.0) while the A form was stable within the pH (4.5- 9.0). The W form was stable with in temperature range (20-45) Cᵒ while the A form was stable within the range (20-50) Cᵒ. Km value were (1.052 and 0.909) mM and V max values were (2.86 and 5) µM/ml/min for both enzyme forms W and A , respectively .

تم تنقية انزيم الانيولينيز من عزلة محلية من الفطر Aspergillus niger واشتملت خطوات التنقية على الترسيب بالكحول الاثيلي %70 فالتبادل الايوني بأستخدام المبادل DEAE-cellulose وأخيرا الترشيح الهلامي مرتين بأستخدام الهلام Sephadex-G-150واسفرت عملية التنقية عن الحصول على على صورتين لأنزيم الانيولينيز(W وA) وبلغ عدد مرات التنقية (6.8 و9.4) مرة والحصيلة الانزيمية (9 و13.5)% لكل من صورتي الأنزيم W وA ,على التوالي. اثبتت نتائج الترحيل الكهربائي ظهورحزمة واحدة لكل من صورتي الانزيم مما يؤكد نقاوتهما بشكل تام.اما نتائج توصيف الانزيم فقد اوضحت ان الوزن الجزيئي لصورة الانزيم W قد بلغ 72.4 بينما بلغ 69.18 لصورة الانزيم A .وكان الرقم الهيدروجيني 4.5 هوالامثل لفعالية كلا صورتي الانزيم, كما كانت الصورة W ثابتة بمدى من الرقم الهيدروجيني (3.5- 7) بينما كانت الصورة A ثابتة بمدى رقم هيدروجيني (4.5-9 ).ابدت الصورة W ثباتا حراريا بمدى (20-45) مᵒ في حين ابدت الصورة A ثباتا بمدى(20-50) مᵒ. وبلغت قيم ثابت ميكالس(1.052 و0.909) ملي مولر والسرعة القصوى (2.86 و5) مايكرومول /مليليتر/ دقيقة لصورتي الأنزيم WوA, على التوالي بأستخدام الانيولين كمادة تفاعل .

Listing 1 - 6 of 6
Sort by
Narrow your search

Resource type

article (6)


Language

Arabic (5)

English (1)


Year
From To Submit

2016 (1)

2015 (1)

2011 (1)

2010 (3)