research centers


Search results: Found 9

Listing 1 - 9 of 9
Sort by

Article
عزل بكتريا Vibrio cholerae وتشخيص أنماطها الحيوية والمصلية وتحت المصلية من المرضى باستخدام Api 20 E والطريقة السريعة Rapid 20 E .

Author: كفاح أحمد جاسم كفاح أحمد جاسم
Journal: Al-Fatih journal مجلة الفتح ISSN: 87521996 Year: 2005 Volume: 1 Issue: 22 Pages: 274-281
Publisher: Diyala University جامعة ديالى

Loading...
Loading...
Abstract

This study was conducted to detect sertypes and subserotype of V.cholerae isolates causing cholera as one of the most epidemiological dengerous and wide spread disease in the world, chronic cases of such disease when untreated fastly lead to the death of patients. For this purpose (265) fecal samples were collected from patients suffered of watery diarrhea (cholera) in (11) governarates of Iraq for the period from April to November 2000. Api 20 E and Rapid 20 E Kits systems were used for bacterial identification. In addition to that sertyping have been also used to detect the serotype and subserotype of polyvalent (01) and monovalent (Ogawa and Inaba). Some biochemical tests were applied to investigate whether the isolates belonged to the results showed biotype Eltor or Classical biotype that (212) isolates were obtaned, (149) of them belonged to endemic biotype (01), (87) to Ogawa, (62) to Inaba and (63) were Non-01 types of Vibrio chloerae. أُجريت الدراسة للتحري عن عزلات بكتريا الكوليرا بأنماطها المصلية وتحت المصلية المسببة لمرض الكوليرا والذي يعد من الأمراض الخطيرة واسعة الانتشار في أنحاء العالم، وتؤدي الحالات الشديدة إلى وفاة المرضى المصابين بهذا المرض.جُمعت لهذا الغرض (265) نموذج براز من المرضى المصابين بالإسهال الكوليري من (11) من محافظات العراق للفترة من نيسان لغاية تشرين الثاني عام 2000. استخدم نظام Api 20E ونظام Rapid 20 E الذي يستخدم لاول مرة في العراق لتشخيص ضمات الكوليرا معطياً النتيجة خلال أربع ساعات فقط، إضافة إلى استخدام المصول التشخيصية لتحديد الأنماط المصلية وتحت المصلية من (01) Polyvalent و Monvalent (Ogawa) و (Indaba)، ووصولاً للتنميط الحيوي فقد استخدمت بعض الفحوصات الكيموحيوية لتحديد كون العزلات تابعة للنمط الحيوي الطور (Eltor) أو النمط التقليدي (Classical).أشارت النتائج إلى إمكانية عزل وتشخيص (212) عزلة تابعة لأنماط مصلية مختلفة من بكتريا V. cholerae كان منها (149) عزلة تابعة للنمط المصلي (01) بتحت أنماطه المصلية (87) Ogawa,Inaba (62), (63) للنمط المصلي Non-01.


Article
One-Step Immunochromatographic Dipstick Test for Rapid Detection of Vibrio cholerae O1 in Stool Samples
خطوة واحدة للكشف السريع عن الكوليرا في عينات الخروج بأستخدام الطريقة المناعية الكروموتوغرافية

Author: Issam Jumaa Nasser د. عصام جمعة ناصر
Journal: IRAQI JOURNALOF COMMUNITY MEDICINE المجلة العراقية لطب المجتمع ISSN: 16845382 Year: 2010 Volume: 23 Issue: 1 Pages: 19-24
Publisher: Al-Mustansyriah University الجامعة المستنصرية

Loading...
Loading...
Abstract

Background: Early detection of cholera outbreaks is crucial for the implementation of the most appropriate control strategies.Objectives: The aim of this study was to evaluate the sensitivity and specificity of a Lateral Flow Immunochromatographic test for the qualitative determination of Lipopolysaccharide (LPS) antigen of Vibrio cholerae O1, from the stool specimen, using specific monoclonal antibodies in comparison to the conventional culture methods.Subjects & Methods: The performance of an immunochromatographic dipstick test (Span, India) specific for Vibrio cholerae was evaluated in Iraq during the 2007 to 25th.January/2009 in cholera outbreak seasons. Fecal specimens were collected from (100) patients with acute watery non bloody diarrhea and tested by dipstick and conventional culture.Results: The results of this study showed that the males prone to be infected with V. cholerae O1 more than females, (61% vs. 39 %) (P>0.05). The mean ± SD age of patients with V. cholerae O1 was (13.5 ± 5.5 years) with no significant difference (P>0.05). Patients under 20 years age group constituted the highest number (57%) with highly significant difference between the age groups (P<0.01).Patients infection with V. cholerae O1 was clearly spread in rural areas with highest percentage (78 %) compared to only (22 %) of patients infected with V. cholerae O1 spread in urban areas with statistical analysis of high significant difference (P < 0.01). The sensitivity of the O1 dipstick on stool samples compared to culture was (94%), with a specificity of (84%).Conclusion: This one-step dipstick test performed well in the diagnosis of V. cholerae in a setting with seasonal outbreaks where rapid tests are most urgently needed.Keywords: Vibrio cholerae, Dipstick, Sensitivity, Specificity. الخلفية: الكشف مبكراًعن حالات تفشّي الكوليرا حاسمُ لتطبيقِ إستراتيجياتِ السيطرةِ الأكثر ملائمة. الهدف: الهدف من هذة الدراسة كان تقيم أداء حساسية وخصوصية أشرطة الاختبار المعتمدة على الطريقة المناعية الكروموتوغرافية بأستخدام (Lipopolysaccharide ) كمُسْتَضد للكشف عن الأصابة بمرض الكوليرا نوع O1 من عينات الخروج، باستعمال أضداد مناوعة احادية النسيلة بالمقارنة مع طرق الزرع التقليديةِ.المواد والطرق: الدراسة الحالية أنجزت خلال الفترةِ 2007- شباط 2009 أثناء انتشار مرض الكوليرا. عينات الخروج جُمِعتْ مِنْ (100) مرضى بالإسهال الحادّ المائيِ غير الدموي لتقيم أداء إختبار أشرطة الاختبارالمعتمدة على الطريقة المناعية الكروموتوغرافية ( شركة Span الهند) مع طرق الزرع التقليديةِ.النَتائِج: نتائج هذه الدراسة أظهرت أن الذكورأكثر عرضة للاصابة بمرض الكوليرا نوع O1 مِنْ الإناث، حيث أن َ الذكور شكلوا(61%) من الحالات الموجبة بينما الإناث شكلوا (39%) فقط من الحالات الموجبة وكان متوسط العمر (13.5±5.5سَنَوات) مع عدم وجود فرق معنوي هام بين َ الذكور و الإناث (P>0.05). الفئة العمرية أقل من (20سنة) شكلت النسبة الاعلى(57%) مع وجود فرق معنوي هام (.(P<0.01 المرضى المصابين بمرض الكوليرا نوع O1 نُشِروا بشكل واضح في المناطق الريفية حيث شكلوا نسبة عالية (78 %) مقارنة مَع (22 %) فقط انتشروا في المناطق الحضريةِ مع وجود فرق معنوي هام (.(P<0.01 وقُدِّرت حساسية وخصوصية اختبار الأشرطة المناعية الكروموتوغرافية في عينات الخروج بالمقارنة مع طرق الزرع التقليدية ِب (94%)و (84%) على التوالي. التوصيات : إختبارِ أشرطة المعتمدة على الطريقة المناعية الكروموتوغرافية في خطوة واحد جيد وسريع جداً في تشخيصِ مرض الكوليرا خصوصاً في حالات التفشّي السريع للكوليرا.


Article
Study of Toxicity, Immunological and some Cytopathic Effects of Vibrio cholerae supernatant
دراسة التأثيرات السمية والمناعية وبعض التأثيرات المرضية في عالق بكتريا Vibrio cholerae

Author: Yasir Basim Abdulwahhab Qaddoori
Journal: journal of kerbala university مجلة جامعة كربلاء ISSN: 18130410 Year: 2013 Volume: 11 Issue: 3 Pages: 95-100
Publisher: Kerbala University جامعة كربلاء

Loading...
Loading...
Abstract

Crude Vibrio cholerae extract was produced by centrifugation and filtration then the amount of protein was estimated by Folin- lowry method and was found equal to 550 microgram/ml. Extract activity was set by infant suckling mouse method. Toxicity was determined by measuring LD50 and was found equals to 57microgram/ml. Rabbit Anti-bacterial extract antibodies was titrated by precipitation method and the result showed that the titer is 40. Ouchterlony double immunodifussion test between several dilutions of the crude bacterial extract and rabbit antiserum showed positive results in 1/40 and 1/80 of the extract dilutions. The cytopathic effect of extract on mice hearts was also studied by injecting number of mice with 55 and 27.5 microgram/ml concentration of the crude extract and it showed that it has no certain effect on this organ. انتج المستخلص الزرعي الخام من بكتريا Vibrio cholerae بالطرد المركزي والترشيح ثم قدرت كمية البروتين بإستخدام طريقة فون- لوري و وجد انها تساوي 550 مايكروغرام/مل، استخدمت طريقة الفأر الرضيع في تحديد فعالية السمية للمستخلص ، حُددت الفعالية السمية للمستخلص الخام بقياس متوسط الجرعة القاتلة و وجد انه يساوي 57 مايكروغرام لكل مل، تمت معايرة الأجسام المضادة للمستخلص في الارنب بطريقة الترسيب واظهرت النتائج ان العيار يساوي 40، كما اظهر اختبار الانتشار المناعي المزدوج في الهلام بين عدة تخافيف من المستخلص ومصل الارنب نتائج ايجابية للتخفيف 1/40 و 1/80، تضمنت الدراسة ايضا تحري الإعتلال الخلوي في قلوب الفئران بحقن عدد منهم بتركيزين هما 27,5 و55 مايكروغرام/مل من المستخلص الخام و قد اظهرت النتائج عدم وجود تأثير يذكر في المقاطع النسيجية للعضو المذكور


Article
The Bactericidal Activity of Gamma ,Beta on Vibrio cholerae resistance to Many of antibiotics (in vitro )
الفعالية القاتلة لاشعة كاما وبيتا على بكتريا ضمات الكوليرا المقاومة لعدد من المضادات الحيوية خارج الجسم الحي

Authors: Mohammed Twffeek Abdul-Hussein1 --- Faris Nabeeh Jaafar2 --- Huda Zuheir Majeed3 --- Ashraf Sami Hassan4 --- et al.
Journal: journal of kerbala university مجلة جامعة كربلاء ISSN: 18130410 Year: 2017 Volume: 15 Issue: 3 Pages: 116-122
Publisher: Kerbala University جامعة كربلاء

Loading...
Loading...
Abstract

This study evaluated the effect of gamma , beta irradiation on Vibrio colerae isolated. The experiment included control (without exposure to irradiation) and 5 replicated doses of each gamma and beta irradiation ,which ranged (1.218×10-4 -0.320µSv) and (63.100 -96.950µSv) respectively. The total effect of gamma and beta irradiation on Vibrio cholerae viability was abrogated at (96.915177 & 63.100 µSv) by 137Cs(1µci) and 137Cs(9µci) respectively, the percentage of killing was highly (84%) and (85%) respectively and the viable cells was fewer than control. Gamma and Beta irradiation is efficient to killing Vibrio cholerae that cause many infection to human and may be cause death. The sensitivity of antibiotics of Vibrio cholerae to ten of antibiotic was tested, the results showed that percent of resistant against V. cholerae to Erythromycin , Methicillin, Ampicillin and Tetracycline was 70%, the percent of resistant to Nalidixic acid was 50%, percent of resistant to Amikacin was 10%, while percent of resistant to Chloramphenicol, Streptomycin, Ciprofloxacin and Norfloxacin was 0%. الدراسة قيمت تأثير اشعة كاما وبيتا على عصيات الكوليرا المعزولة . التجربة تضمنت نماذج السيطرة بدون التعرض للاشعاع و (5) جرع من الاشعاع لكل من اشعة كاما واشعة بيتا بمعدل (1.218×10-4 -0.320µSv) و (63.100 -96.950µSv) على التوالي. التاثير القاتل لاشعة كاما واشعة بيتا على عصيات الكوليرا تم ابقاءه على (96.915177) و (63.100 µSv) بواسطة 137Cs(1µci) و 137Cs(9µci) وعلى التوالي .نسبة القتل كانت عالية (84%) و (85%) على التوالي والخلايا القادرة على الحياة كانت اقل من السيطرة .اشعة كاما واشعة بيتا كانت فعالة في قتل عصيات الكوليرا والتي تسبب العديد من الاصابات الى الانسان وربما تسبب الوفاة .اختبرت حساسية عصيات الكوليرا العشرة من المضادات الحيوية والنتائج اظهرت بان نسبة مقاومة عصيات الكوليرا لمضاد الارثرومايسين والمثيسلين والامبسلين كانت (70%) ونسبة المقاومة لمضاد النالدكسك اسد كانت (50%) ونسبة المقاومة لمضاد الاميكاسين كانت (10%) بينما كانت المقاومة لمضاد الكلورامفينيكول والستربتومايسين والسبروفلوكساسين والنورفلوكساسين (0%) .


Article
Immobilization of Vibrio cholerae S1 (NAG) L-Glutaminase on Different Supports
تقييد انزيم الكلوتامينيز المستخلص من Vibrio cholerae S1 بامتزازه على مواد ساندة مختلفة.

Author: Shatha Salman Hassan شذى سلمان حسن
Journal: Baghdad Science Journal مجلة بغداد للعلوم ISSN: 20788665 24117986 Year: 2010 Volume: 7 Issue: 2 Pages: 969-976
Publisher: Baghdad University جامعة بغداد

Loading...
Loading...
Abstract

Sixteen Vibrio isolates producing L-glutaminase were obtained from clinical and water samples , one isolate was selected according to its’ highest enzyme productivity , it was identified as Vibrio cholerae (NAG) and coded as V. cholerae S1. The bacteria was cultured in a liquid medium (containing L-glutamine) , L-glutaminase was extracted from the cells by ultrasonication , the enzyme was precipitated by 30 % saturation of ammonium sulphate , dialyzed and immobilized by adsorption on different supports including Sephadex G-100 , cellulose powder , starch , silica gel , glass beads and charcoal.Sephadex G-100 retained most of enzyme activity (90 %) followed by starch (78 %) , then silica gel and cellulose powder (71 %) while glass beads and charcoal retained 58 % only.The immobilized enzyme was subjected to different temperatures and pHs. The results showed that the immobilized enzyme is more stable than the free enzyme in different temperatures and pHs. Silica gel was the best matrix for protecting L-glutaminase against heat , it retained 52 and 22 % of the original activity after 2 hrs of incubation at 50 and 60 ۫c respectively while the free enzyme retained 30 and 10 % at the same conditions.The immobilized enzyme was more stable at pH 7 than at pH 4 or 10 . the enzyme adsorbed on Sephadex G-100 retained the maximum activity (98 %) at pH 7 for 2 hrs , while it was 73 % for the free enzyme.The immobilized L-glutaminase of V. cholerae S1 (with Sephadex G-100) was stored at 4 ۫c for 30 days , the remaining activity was 35 % , while it was 18 % for the free enzyme.It can be concluded from these results that V. cholerae S1 L-glutaminase can be immobilized on different inert materials, Sephadex G-100 is more suitable in this project , Silica gel can protect the enzyme against heat. In general the immobilized enzyme is more stable at different temperatures , pH and time than the free enzyme. تـــــم الحصـول عـــــلـــى ست عشرة عزلة لبكتريا Vibrio منتجة لانزيم الكلوتامينيز (L-glutaminase) من نماذج سريرية ومياه ، وانتخبت عزلة واحدة اعتماداً على انتاجيتها الاعلى للانزيم ، وشخصت على انها Vibrio cholerae (NAG) واعطي لها الرمز S1.نميت البكتريا في وسط سائل (يحتوي على الكلوتامين) ، واستخلص الانزيم من الخلايا بعد تكسيرها بالموجات فوق الصوتية.ورسب الانزيم باستعمال كبريتات الامونيوم بنسبة اشباع 30% ، وتمت ديلزته ، ثم قيد بامتزازه على مواد ساندة مختلفة تضمنت السيفادكس (Sephadex G-100) ، ومسحوق السليلوز ، والنشا ، وهلام السليكا ، والخرز الزجاجية ، والفحم. بينت النتائج ان Sephadex G-100 يحتفظ بمعظم فعالية الانزيم (90 %) يعقبه النشا (78 %) ثم هلام السليكا والسليلوز (71 %) بينما أحتفظ الفحم والخرز الزجاجية بـ 58 % فقط من فعالية الانزيم.تم تعريض الانزيم المقيد والحر لدرجات حرارية وقيم رقم هيدروجيني مختلفة ، ولوحظ ان الانزيم المقيد اكثر ثباتاً من الانزيم الحر في درجات الحرارة المختلفة وقيم الرقم الهايدروجيني ، واظهر هلام السليكا حماية جيدة للانزيم في درجات الحرارة العالية إذ بقي محتفظاً بـ 54 % و 22 % من الفعالية الاصلية عند تعريضه لدرجة 50 و 60م لمدة ساعتين على التوالي في حين احتفظ الانزيم الحر بـ 30 % و 10 % في هاتين الدرجتين.لوحظ ان الانزيم المقيد اكثر ثباتاً برقم هايدروجيني 7 مما عليه برقم 4 او 10 واحتفظ الانزيم المقيد بالسيفادكس (Sephadex G-100) باعلى نسبة فعالية (98 %) عند الرقم الهايدروجيني 7 لمدة ساعتين بينما احتفظ الانزيم الحر بـ 73 % في الظروف نفسها. وعندما حفظ الانزيم المقيد بدرجة 4م لمدة شهر بقي محتفظاً بـ 35 % من فعاليته قياساً بالانزيم الحر الذي احتفظ بـ 18 %.من هذه النتائج يتبين ان انزيم الكلوتامينيز المنتج من بكتريا V. cholerae S1 يمكن تقييده بطريقة الامتزاز على مواد مختلفة ، وان Sephadex G-100 مادة ملائمة لتقييده والحفاظ على فعالية عالية ، وان هلام السليكا يحمي الانزيم من الحرارة العالية بشكل افضل من غيره والانزيم المقيد عموماً اكثر ثباتاً من الانزيم الحر في درجات الحرارة وقيم الرقم الهيدروجيني المختلفة فضلاً عن ثباته الخزني.


Article
Identification and Purification of Cholera Like Toxin from Environmental Isolate of Vibrio cholerae
تشخيص وتنقية ذيفان شبيه بذيفان الكوليرا من عزلة بيئية لبكترياVibrio cholerae

Authors: Amina N. Al- Thwani امنة نعمة الثويني --- Khlood A. Al-Khafaji خلود عبد الإله الخفاجي
Journal: Baghdad Science Journal مجلة بغداد للعلوم ISSN: 20788665 24117986 Year: 2010 Volume: 7 Issue: عدد خاص بمؤتمر العلمي النسوي 1 Pages: 415-423
Publisher: Baghdad University جامعة بغداد

Loading...
Loading...
Abstract

The presence and prevalence of V. cholerae were investigated in forty five water samples collected from different locations of Tiger River/ Baghdad city. Twenty one isolates were isolated by adopting a simple isolation techniques. The final identification revealed that only three isolates were confirmed as V. cholerae. They were named 1J, 1R and Dial 131 which are all serogrouped as non-O1. Toxin Coregulated Pili (TCP) and heat labile enterotoxin (LT) were determined in only the environmental isolate 1J while non of the isolates produced heat stabile toxin (ST).The purification scheme was improved, few steps were adopted to include back extraction of ammonium sulfate, saturation between 80-20%, desalting through Sephadex G25, and gel filtration using Sephadex G100 which highly increase the specific activity. تم التحري عن وجود V.cholerae في خمس واربعين نموذج ماء لمختلف مناطق نهر دجله/بغداد وامكن عزل احدى وعشرين عزله باستخدام تقنية بسيطة للعزل واوضح التشخيص النهائي ان ثلاث عزلات فقط تعود للنوع V. cholerae النوع المصلي non-O1 وسميت 1J,1RDial 131 .اظهر التحري عن عوامل الضراوة انتاج ذيفان عامل الالتصاق و الذيفان الحساس للحرارة من العزلة البيئية1J بينما لوحظ عدم انتاج الذيفان المقاوم للحرارة من قبل العزلات الثلاث.طورت عملية التنقية ليشمل المخطط خطوات قليلة فيها الاستخلاص المعاكس بملح كبريتات الامونيوم بتراكيز80-20 % وعملية ازالة الاملاح من خلال استخدام Sephadex G25 والغربلة بالهلام باستعمال هلام Sephadex G100 وقد ازدادت الفعالية النوعية لاخر خطوة بصورة كبيرة.


Article
production of hemolysin enzyme from local isolated of vibrio cholerae bacteria isolated from diarrhea patients
Vibrio من العزلة المحلیة لبكتریا Hemolysin إنتاج إنزیم الھیمولایسین المعزولة من مرضى مصابین بالإسھال cholerae

Author: *محمد ابراھیم نادر
Journal: Diyala Journal For Pure Science مجلة ديالى للعلوم الصرفة ISSN: 83732222 25189255 Year: 2012 Volume: 8 Issue: 2 Pages: 18-31
Publisher: Diyala University جامعة ديالى

Loading...
Loading...
Abstract

Diagnosed 26 isolate of vibrio cholera was isolated from clinical sources responsibleof causing diarrhea. All isolates showed high productivity of hemolysin by differentefficiency. Semi quantitative screening on a selective solid medium (blood ager additive 7%blood) showed that all isolates have the ability to produce hemolysin as indicated by theformation of clear zone around the colonies.The selected isolate characterized as Vibrio cholera AMK6 based on its highproduction of enzyme and used in the present study. The optimum conditions for hemolysinproduction by submerged cultures (brain heart infusion containing 3%Glycerol) with aninoculums size of 3x108 CFU at an initial pH of 8 with shaking incubation at 35oC, 150cycle/min for 24 hours تم عزل تشخيص 26 عزل من ضمة الكوليرا من مصادر مسؤولة السريرية من تسبب الاسهال. وأظهرت جميع العزلات إنتاجية عالية من حالة دموية من قبل مختلف كفاءة. الكمية فحص نصف في المتوسط ​​صلبة انتقائي (الدم المضافة اجير 7٪ وأظهرت الدم) أن جميع العزلات لها القدرة على إنتاج حالة دموية كما يدل على ذلك تشكيل منطقة واضحة حول المستعمرات. العزلة تميزت مختارة مثل الكوليرا الضمة AMK6 على أساس ارتفاع لها انتاج الانزيم، واستخدمت في هذه الدراسة. الظروف المثلى لحالة دموية الإنتاج من الثقافات المغمورة (الدماغ ضخ القلب التي تحتوي على الجلسرين 3٪) مع اللقاح حجم 3x108 CFU في الأس الهيدروجيني الأولي لل8 مع اهتزاز عند 150 حضانة، 35oC دورة / دقيقة لمدة 24 ساعة


Article
Study the effect of different concentrations of some heavy metals on the growth of V.cholerae
دراسة تأثير تراكيز مختلفة لبعض العناصر الثقيلة على نمو بكتيريا ضمات الكوليرا

Authors: najdat B.mahdi نجدت بهجت مهدي --- zuhair N. hamad زهير نعمان حمد --- raad K. aziz رعد خليل عزيز
Journal: Diyala Journal For Pure Science مجلة ديالى للعلوم الصرفة ISSN: 83732222 25189255 Year: 2012 Volume: 8 Issue: 3 - part 2 Pages: 279-293
Publisher: Diyala University جامعة ديالى

Loading...
Loading...
Abstract

The study Investigates about the tolerance of 14 isolates of V .cholerae (includes 7 serotype 01 and 7 serotype NON 01) to different concentrations of some heavy metals such as: Hg ,Cu ,Cd ,Zn ,Co and Pb. The isolates were from different aquatic environment and fish gut in diala governorate from May to Augustus 2004. Concentration of 0.2, 2.4, 1.2, 1.4, 0.9 and 2.4 mol of mercury, cooper, cadmium, zinc, cobalt, lead respectively, inhibited the growth of V. cholerae , regardless the serotype or source of isolation. شملت الدراسة التحري عن مدى تحمل14 عزلة من بكتيريا ضمات الكوليرا Vibrio cholerae وتضمنت 7 عزلات من النمط المصلي01 و7 عزلات من النمط المصلي Non-01 والمعزولة من بيئات مائية مختلفة(مياه اسنة،مياه مبازل،نهر ديالى) وامعاء الاسماك في محافظة ديالى لتراكيز مختلفة لبعض العناصر الثقيلة(الزئبق, النحاس,الكادميوم,الخارصين,أالكوبلت ,الرصاص). أظهرت الدراسة أن ضمات الكوليرا المعزولة من المياه وأمعاء الأسماك لم تستطع من النمو على أوساط تحوي تراكيز 0.2 و2,3 و1.1 و1.3 و0.9 و2.3 ملي مول من عناصر الزئبق والنحاس والكادميوم والخارصين والكوبلت والرصاص على التوالي.لم تكن مقاومة العناصر الثقيلة مرتبطة بالنمط المصلي أو مصدر العزل بصورة عامة.


Article
PURIFICATION AND CHARACTERIZATION OF CHOLERA TOXIN FROM CLINICAL ISOLATE OF Vibrio cholerae
تنقية وتوصيف ذيفان الكوليرا من عزلات مرضية لبكتريا Vibrio cholerae

Author: خلود عبد الإله الخفاجي
Journal: Iraqi Journal of Biotechnology المجلة العراقية للتقانات الحياتية ISSN: 18154794 Year: 2010 Volume: 9 Issue: 2 Pages: 211-225
Publisher: Baghdad University جامعة بغداد

Loading...
Loading...
Abstract

In this study fifteen diarrhea isolates suspected as V. cholerae were obtained from Central Health Laboratory/ Ministry of Health and their identification indicated that four isolates were belonged to O1 serotype and designated as S,18,22,13 and all from El Tor biotype, while the fifth isolate was serogrouped as non-O1 serotype and designated as V. cholerae ab. Heat labile enterotoxin (LT) were determined in all clinical O1 and non-O1and the purification scheme was improved; few steps were adopted to include back extraction of Ammonium Sulfate saturation between 20-80%, desalting through Sephadex G-25 and gel filtration by Sephadex G-100. The specific activity was increased to 100 fold at the final step. The toxin purity indicated no other protein detected in toxin preparation by employing gel filtration and SDS-PAGE. The toxin had a molecular weight of 83.17 KDa as indicated by gel filtration. The stability of purified CT at different temperature proved that CT could be stored at -4°C for 6 month without loss in bioactivity, while remaining activity (%) reached to 35% and 20% after 30min incubation at 45°C and 55°C and 65°C respectively. The bioactivity of toxin diminished at 100°C for 10 min. The remaining activity (%) of purified CT treated with different PHs showed CT susceptibility to low pH (2 – 4) moderate stability at pH 7 and high stability at pH 8 - 9. تم الحصول على خمسة عشر عزلة بكتيرية لحالات إسهال من مختبر الصحة المركزي/وزارة الصحة وشخصت خمس عزلات بأنها V. cholerae وتبين بأن أربع عزلات عائده للنمط المصلي O1 وسميت S و18 و22و13 وان العزلة الخامسة عائده للنمط المصلي non-O1وأطلق عليهاab. أظهر التحري عن عوامل الضراوة إنتاج العزلات المرضية جميعها للذيفان الحساس للحرارة وقد طورت عملية التنقية ليشمل المخطط خطوات قليلة فيها الاستخلاص المعاكس بملح كبريتات الامونيوم بتراكيز20- 80 % وعملية إزالة الأملاح من خلال استعمال Sephadex G-25 والغربلة بالهلام باستعمال هلام Sephadex G-100 وقد ازدادت الفعالية النوعية لآخر خطوة 100 مرة. أظهر توصيف الذيفان نقاوة المنتج لخلوه من أي بروتينات أخرى من الغربلة بالهلام والترحيل بهلام الاكريل امايد بوجودSDS وأثبت تحديد الوزن الجزيئي بوساطة الغربلة بالهلام ان مستخلص الذيفان هو بوزن 83,17 كيلو دالتون. أوضحت نتائج الثبات الحراري لذيفان CTامكانية خزن مستخلص الذيفان بدرجة -4مº ولمدة ستة اشهر دون فقدان الفعالية الحيوية بينما وصلت النسبة المؤية للفعالية الحيوية المتبقية إلى 35% و20% بعد 30 دقيقة حضن بدرجة 45º م و55º م و65º م على التوالي وقد اختفت الفعالية الحيوية بعد 10 دقائق حضن بدرجة 100 ºم. أظهرت النسب المئوية للفعالية المتبقية لذيفان الكوليرا المحضون في أرقام هايدروجينيه مختلفة حساسية الذيفان للأرقام الهيروجينيه المنخفضة 2و4 وثباتية معتدلة في الرقم الهايدروجيني 7 وثباتية المنتج العاليه في الأرقام الهيروجينيه 8.5 و9.

Listing 1 - 9 of 9
Sort by
Narrow your search

Resource type

article (9)


Language

English (6)

Arabic and English (2)

Arabic (1)


Year
From To Submit

2017 (1)

2013 (1)

2012 (2)

2010 (4)

2005 (1)